Animalia-ehunen Direct PCR kit (laginketa tresnarik gabe) Protokoloa
Deskribapenak
Kit honek lisi-buffer sistema berezia erabiltzen du animalia-ehunen laginetatik DNA genomikoa azkar askatzeko PCR erreakzioetarako, beraz, bereziki egokia da eskala handiko proba genetikoak egiteko.
Lisi-bufferretik DNA genomikoa askatzeko prozesua 10-30 minututan amaitzen da 65 °C-tan.Ez da beharrezkoa proteina eta RNA kentzea bezalako beste prozesurik, eta askatutako aztarna DNA PCR erreakziorako txantiloi gisa erabil daiteke.
2 × PCR ErrazaTMMix PCR erreakzio inhibitzaileekiko tolerantzia handia du, eta probatu beharreko laginaren lisatua anplifikazio eraginkor eta espezifikorako txantiloi gisa erabil dezake.Erreaktibo honek Foregene D-Taq DNAPolymerase, dNTPs, MgCl ditu2, erreakzio buffer, PCR optimizatzailea eta egonkortzailea.
D-Taq DNA polimerasa Foregenek PCR zuzeneko erreakzioetarako bereziki garatu duen DNA polimerasa da.D-Taq DNA polimerasak tolerantzia handia du PCR erreakzio inhibitzaile ezberdinekiko, eta DNAren arrastoak modu eraginkorrean handitu ditzake hainbat erreakzio-sistema konplexutan, eta anplifikazio-abiadura 2Kb/min irits daiteke, PCR zuzeneko erreakziorako bereziki egokia dena.
Zehaztapenak
50×20µl rxns, 200×20µl rxns, 500×20µl rxns, 2000×20µl rxns
Kitaren osagaiak
I. zatia | Buffer AL |
Proteasa aurreko genea | |
6× DNA kargatzeko buffer | |
II. zatia | 2 × PCR ErrazaTMNahastu |
Ezaugarriak eta abantailak
■Ez da denbora behar eta garestia DNA arazketa
■ Laginaren eskaria txikia da, 5 mg-ko animalia-ehun bezain gutxi probatu daitezke.
■ Ez da tratamendu berezirik behar, hala nola ehotzea eta birrintzea, eta funtzionamendua erraza da.
■ PCR sistema optimizatuak PCR espezifikotasun handiagoa eta PCR erreakzio inhibitzaileekiko tolerantzia handiagoa izatea eragiten du.
Kitaren parametroak
Aplikazioa: hainbat animalia ehun.
Laginaren lisisetik askatzen den DNA: PCR txantiloi gisa bakarrik erabiltzen da.
Kita helburu hauetarako erabil daiteke: transgenosiaren identifikazioa, animalien genotipizazioa, etab.
Lan-fluxua
Biltegiratzea eta Iraupena
Kit honen I. zatia 2-8tan gorde behar da℃.
Buffer AL erreaktiboa 12 hilabetez gorde daiteke baldintza lehorrean;2-8an gorde daiteke℃biltegiratze luzeagorako.
Foregene Protease erreaktiboak formula berezia du.Bere jarduera eta egonkortasuna bermatzeko, gorde ezazu 4℃12 hilabetez.
Erreaktiboa 6×DNA Loading Buffer 4an gorde daiteke℃edo -20℃denbora luzez.
Kit honen II zatia -20etan gorde behar da℃.
Erreaktiboa 2×PCR ErrazaTMNahasketa 12 hilabetez gorde daiteke -20etan℃;maiz erabiltzen bada, 4an ere gorde daiteke℃epe laburreko biltegiratzeko (10 eguneko epean erabili).