Lnc-RT Heroᵀᴹ I (gDNasarekin) (lncRNAren lehen katearen cDNA sintesirako Super Premix)
Zehaztapenak
25×20μl Rxns, 50×20μl Rxns
Lnc-RT HeroTM I (gDNaserekin) lncRNArako bereziki garatutako alderantzizko transkripzio sistema bat da, DNA genomikoaren kutsadura azkar kentzeko.5×gDNase Mixek RNAn geratzen den genoma azkar kendu dezake 42 °C-tan 2 minutuz, qPCR emaitzetan genomaren interferentzia eraginkorra saihestuz.
5×L-RT HeroTM Mixek Foregene-k bereziki garatu duen Foregene LncRNA Reverse Transcriptase du, hau da, alderantzizko transkriptasa mota berri bat lncRNA eta beste RNA konplexu luzeko txantiloietarako bereziki, RNA afinitate handiagoarekin eta alderantzizko grabazio eraginkortasun handiagoarekin.Sistema optimizatuak alderantzizko transkripzio-tasa azkarrago egiten du eta erraz transkriba ditzake GC eduki handiko eta egitura sekundario konplexuko RNA txantiloiak.Lehen katearen cDNA sintesia 42 °C-tan burutu daiteke 15 minututan.
Kitaren osagaiak
5× gDNase Mix |
5× L-RT HeroTM Mix |
RNasik gabeko ddH2O |
Argibideak |
Ezaugarriak eta abantailak
■GDNA kentzeko gaitasun eraginkorra, txantiloian gDNA ken dezake 2 minuturen buruan.
■ LncRNAren transkripzioa modu eraginkorrean alderantzikatu dezake.Alderantzizko transkripzio-produktua qPCR-a jasaten denean, Ct balioa alderantzizko transkripzio-sistema konbentzionalarena baino txikiagoa da.
■ Alderantzizko transkripzio-sistema eraginkorra, 15 minutu baino ez ditu behar lehen katearen cDNAren sintesia osatzeko.
■ Txantiloi konplexuak: GC eduki handia eta egitura sekundario konplexua duten txantiloiak ere eraginkortasun handiz alderantzikatu daitezke.
■ Sentikortasun handiko alderantzizko transkripzio-sistema, pg-mailako txantiloiak kalitate handiko cDNA ere lor dezakete.
■ Alderantzizko transkripzio-sistemak egonkortasun termiko handia du, erreakzio-tenperatura optimoa 42 da℃, eta alderantzizko transkripzioaren errendimendu ona du oraindik 50ean℃.
Kit aplikazioa
lncRNA analisi kuantitatibo erlatiboa.
lncRNA analisi kuantitatibo absolutua.
Azkar eta zehaztasunez azter ditzake RNA arrastoak, hala nola RNA birusa.
GC eduki handia edo egitura sekundario konplexua duten RNA txantiloien alderantzizko transkripzioa.
Lan-fluxua
Biltegiratzea eta Iraupena
Kita -20etan gorde behar da°C. Gorde produktua tenperatura konstanteko hozkailuan -20-tan°C jaso eta berehala.Biltegiratze-baldintzak egokiak badira, produktuak ez du errendimendurik kaltetuko urtebeteko balio-aldian.
Arazoak aztertzeko gida
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-anplifikazio espezifikoa
1. Arrazoigabeko primer diseinua
Gomendioa: Primer diseinu-printzipioen arabera diseinatzea.
2. Genomaren hondakinak.
Iradokizuna: Ziurtatu gDNA kentzeko erreakzio-tenperaturaren lehen urratsa 42 °C-koa dela, eta erreakzio-denbora ere 5min-ra luza daitekeela.
RT-qPCR bidez anplifikazio seinalerik ez
1. RNA degradatu egiten da.
Gomendioa: RNA erauzteko materialak ahalik eta freskoena izan behar du, eta kalitate handiko eta purutasun handiko RNA erabili behar da.
2. RNAk inhibitzaileak ditu.
Gomendioa: alderantzizko transkripzioaren inhibitzaileen artean, oro har, SDS, guanidina-gatzak, EDTA eta abar daude. RNA-ko hauspeakinak %70eko etanolarekin garbitzea gomendatzen da inhibitzaileak kentzeko.
3. Primer diseinu-gaiak.
Gomendioa: inprimagailuen diseinuaren printzipioaren arabera, berdiseinatu lehengaiak ikuskatzeko.
Helburu-banda kontrol hutsean agertzen da
1. Erreminta eragileak edo erreaktiboak kutsatzea.
Gomendioa: esperimenturako erreaktibo edo ekipamendu guztiak autoklabetu behar dira.Kontuz ibili eta leun maneiatzen duzunean, DNA laginak pipetatik zurrupatu edo zentrifugagailutik isuri ez daitezen.
2. PCR erreakzio-sistema prestatzerakoan kutsadura gertatu da.
Gomendioa: Hartu beharrezko neurriak manipulatzerakoan, hala nola: latexezko eskularruak erabiltzea, iragazki-puntak erabiltzea.Erabili denbora errealeko PCR Mix kutsaduraren aurkako sistema batean.
3. Primerak degradatu egiten dira.
Iradokizuna: Erabili SDS-PAGE elektroforesia abiarazleak degradatuta dauden ala ez detektatzeko, eta ordeztu abiarazte berriekin fluoreszentzia detektatzeko esperimentuetarako.
Argibide eskuliburua: