Antigorputzak, immunoglobulinak (Ig) ere deitzen direnak, antigenoei bereziki lotzen zaizkien glikoproteinak dira.
 
Ohiko antigorputzen prestaketa animaliak immunizatuz eta antisueroa bilduz sortzen da.Hori dela eta, antiserumak normalean zerikusirik ez duten beste antigeno batzuen eta serumeko beste proteina osagai batzuen aurkako antigorputzak ditu.Antigeno-molekula orokorrek gehienbat epitopo ezberdin ugari dituzte, beraz, ohiko antigorputzak epitopo ezberdinen aurkako antigorputzen nahasketa dira.Epitopo beraren aurka zuzendutako ohiko serum antigorputzak ere B zelula klon ezberdinek sortutako antigorputz heterogeneoez osatuta daude.Hori dela eta, serum-antigorputz konbentzionalei antigorputz poliklonalak, edo laburbilduz, antigorputz poliklonalak ere deitzen zaie.
 
Antigorputz monoklonala (antigorputz monoklonala) B zelulen klon bakar batek sortutako antigorputz oso uniformea ​​da eta epitopo zehatz baten aurka soilik zuzendua.Hibridoma teknologiaren bidez prestatzen da normalean; hibridoma antigorputzaren teknologia zelulen fusioaren teknologian oinarritzen da, B zelulak antigorputz espezifikoak eta mieloma zelulak hazkuntza ahalmen infinitua duten B zelulen hibridometan jariatzeko gaitasunarekin konbinatuz.Hibridoma zelula honek zelula guraso baten ezaugarriak ditu.In vitro mugagabe eta hilezkorra ugal daiteke, mieloma zelulak bezala, eta linfozito esplenikoak bezalako antigorputz espezifikoak sintetizatu eta jaria ditzake.Klonaren bidez, hibridoma zelula bakar batetik eratorritako lerro monoklonal bat lor daiteke, hau da, hibridoma zelula lerro bat.Sortzen dituen antigorputzak determinatzaile antigeniko beraren aurkako antigorputz oso homogeneoak dira, hau da, antigorputz monoklonalak.
 
Antigorputzak Y formako monomero bat edo gehiago bezala daude (hau da, antigorputz monoklonalak edo antigorputz poliklonalak).Y formako monomero bakoitza 4 kate polipeptidikoz osatuta dago, bi kate astun berdin eta bi kate arin berdin barne.Kate arina eta kate astuna euren pisu molekularren arabera izendatzen dira.Y itxurako egituraren goiko aldea eskualde aldakorra da, hau da, antigenoa lotzeko gunea.(Detai Bio-Monoclonal Antibody Concept-en zatia)
 
Antigorputzen egitura
Kate astuna
Ugaztunen Ig kate astunak bost mota daude, α, δ, ε, γ eta μ letrekin grekoekin izendatuak.Dagozkion antigorputzak IgA, IgD, IgE, IgG eta IgM deitzen dira.Kate astun desberdinak tamainan eta konposizioan desberdinak dira.α eta γ gutxi gorabehera 450 aminoazido dituzte, μ eta ε, berriz, 550 aminoazido gutxi gorabehera.
Kate astun bakoitzak bi eskualde ditu: eskualde konstantea eta eskualde aldakorra.Mota bereko antigorputz guztiek eskualde konstante bera dute, baina desberdintasunak daude mota ezberdinetako antigorputzen artean.γ, α eta δ kate astunen eskualde konstanteak hiru Ig domeinuz osatuta daude tandem, bere malgutasuna areagotzeko bisagra eskualde batekin;μ eta ε kate astunetako eskualde konstanteak 4 Ig domeinuz osatuta daude.B zelula ezberdinek ekoitzitako antigorputz kate astunaren eskualde aldakorra ezberdina da, baina B zelula edo zelula klon berak sortutako antigorputzaren eskualde aldakorra berdina da, eta kate astun bakoitzaren eskualde aldakorra 110 aminoazido ingurukoa da., Eta Ig domeinu bakarra osatu.
 
Kate arina
Ugaztunetan bi kate arin mota baino ez daude: lambda mota eta kappa mota.Kate arin bakoitzak bi domeinu lotuta ditu: eskualde konstante bat eta eskualde aldakorra.Kate arinaren luzera 211 ~ 217 aminoazido ingurukoa da.Antigorputz bakoitzean dauden bi kate arin berdinak dira beti.Ugaztunen kasuan, antigorputz bakoitzeko kate arinak mota bakarra du: kappa edo lambda.Beheko ornodun batzuetan, arrain kartilaginosoetan (arrain kartilagoetan) eta arrain hezurtsuetan, beste kate arin mota batzuk ere aurkitzen dira, hala nola iota (iota) motakoak.
 
Fab eta Fc segmentuak
Fc segmentua entzimekin edo koloratzaile fluoreszenteekin zuzenean konbina daiteke antigorputzak markatzeko.ELISA prozesuan antigorputzak plaka errematxatzen duen zatia da, eta bigarren antigorputza immunoprezipitazioan, immunoblottingean eta immunohistokimikan ezagutzen eta lotzen den zatia da.Antigorputzak bi F(ab) segmentutan eta Fc segmentu batean hidroliza daitezke papaina bezalako entzima proteolitikoen bidez, edo pepsinaren bisagra-eskualdetik hautsi eta F(ab)2 segmentu batean eta Fc segmentu batean hidroliza daitezke.IgG antigorputz zatiak batzuetan oso erabilgarriak dira.Fc segmentuaren falta dela eta, F(ab) segmentua ez da antigenoarekin hauspeatuko, ezta immune-zelulek harrapatuko in vivo azterketetan.Zati molekular txikiak eta gurutzatze-funtzio falta direla eta (Fc segmentuaren falta dela eta), Fab segmentua normalean ikerketa funtzionaletan erradiomarkatzeko erabiltzen da, eta Fc segmentua tindaketa histokimikoan blokeatzaile gisa erabiltzen da nagusiki.
 
Eskualde aldakorrak eta konstanteak
Eskualde aldakorra (V eskualdea) H katearen 1/5 edo 1/4 (118 aminoazido-hondakin inguru ditu) N-muturretik gertu dago eta 1/2 (108-111 aminoazido-hondar inguru dituena) L katearen N-muturretik gertu.V eskualde bakoitzak kate barruko lotur disulfuroek eratutako eraztun peptidiko bat du, eta eraztun peptidiko bakoitzak gutxi gorabehera 67 eta 75 aminoazido-hondar ditu.V eskualdeko aminoazidoen konposizioak eta antolaketak antigorputzaren antigenoaren lotura espezifikotasuna zehazten du.V eskualdean etengabe aldatzen diren aminoazidoen mota eta sekuentzia dela eta, lotesle-antigeno espezifikotasun desberdinak dituzten antigorputzak sor daitezke.L katearen eta H katearen V eskualdeei VL eta VH deitzen zaie, hurrenez hurren.VL eta VHn, tokiko eskualde batzuen aminoazidoen konposizioak eta sekuentziak aldakuntza-maila handiagoa dute.Eskualde horiei eskualde hiperaldagaiak (HVR) deitzen zaie.V eskualdean ez diren HVR zatien aminoazidoen konposizioa eta antolamendua nahiko kontserbadoreak dira, esparru-eskualdea deitzen zaiona.VLn hiru eskualde hiperaldagarri daude, normalean 24 eta 34 eta 89 eta 97 aminoazidoen hondakinetan kokatuak.VL eta VH-ren hiru HVRei HVR1, HVR2 eta HVR3 deitzen zaie, hurrenez hurren.X izpien kristalen difrakzioaren ikerketak eta azterketak frogatu zuten eskualde hiperaldakorra dela antigorputz-antigenoa lotzen den lekua dela, beraz, osagarritasuna determinatzen duen eskualdea (CDR) deitzen zaio.VL eta VH-ren HVR1, HVR2 eta HVR3 CDR1, CDR2 eta CDR3 dei daitezke hurrenez hurren.Orokorrean, CDR3-k hiperaldagarritasun-maila handiagoa du.Eskualde hiperaldakorra da Ig molekulen determinatzaile idiotipikoak dauden toki nagusia ere.Kasu gehienetan, H kateak paper garrantzitsuagoa betetzen du antigenoarekin lotzeko.
Eskualde konstantea (C eskualdea)H katearen 3/4 edo 4/5 (gutxi gorabehera 119 aminoazidotik C terminalera) kokatuta dago C muturretik gertu eta 1/2 (105 aminoazido-hondakin inguru ditu) L katearen C muturretik gertu.H kateko eskualde funtzional bakoitzak 110 aminoazido-hondakin inguru ditu, eta disulfuro-loturen bidez loturiko 50-60 aminoazido-hondakinez osatutako eraztun peptidiko bat dauka.Eskualde honen aminoazidoen konposizioa eta antolamendua nahiko konstanteak dira animalia Ig isotipo L kate berean eta H mota berean.Berdin, dagokion antigenoarekin soilik lotu daiteke, baina bere C eskualdearen egitura berdina da, hau da, antigenikotasun bera du.Zaldiaren aurkako IgG antigorputz sekundarioa (edo antigorputza) bi antigorputzekin konbinatu daiteke exotoxina desberdinen aurkako antigorputzen konbinazio bat (IgG).Oinarri garrantzitsua da bigarren mailako antigorputzak prestatzeko eta fluoreszeina, isotopoak, entzimak eta etiketatutako beste antigorputzak aplikatzeko.
 
 
Erlazionatutako produktuak:
Cell Direct RT-qPCR kit