Ohiko galderakAnimalia Guztira RNA isolatzeko kit

Aurki ditzakezun arazoen analisia honako hauanimalien ehuna/zelulen RNA erauztea will help you with your experiments. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali : Tech@foregene.com.

RNA ez da erauzten edo RNA etekinak baxuak dira

Askotan, errekuperazio-eraginkortasuna eragiten duten hainbat faktore egon ohi dira, hala nola: ehun-laginaren RNA-edukia, funtzionamendu-metodoa, eluzio-bolumena, etab.

1. Funtzionamenduan izotz-bainua edo (4 °C) zentrifugazio kriogenikoa egin zen.

Gomendioa: giro-tenperaturan (15-25 º C) funtzionatzea prozesu osoan zehar, ez izoztu bainu eta zentrifugatu tenperatura baxuetan.

2. Laginak ezegoki kontserbatzea edo gehiegizko laginak biltegiratzeko denbora.

Gomendioa: gorde laginak -80 °C-tan edo izoztu nitrogeno likidoan eta saihestu izozte-desizozte errepikatu erabiltzea;saiatu ehun freskoa edo hazitako zelula erabiltzen RNA erauzketarako.

3. Laginaren lisi nahikoa.

Gomendioa: Ehuna homogeneizatzean, ziurtatu ehuna behar bezain homogeneizatuta dagoela eta ehun-zelulak behar adina zatituta daudela RNA-ren askapena azaltzeko.

4. Elutzailea ez da behar bezala gehitzen.

Gomendioa: berretsi RNaserik gabeko ddH dela₂O tantaka gehitzen da arazketa-zutabearen mintzaren erdialdean.

5. Etanol absolutuaren bolumen zuzena ez zen gehitu Buffer RL2 edo Buffer RW2ra.

Gomendioa: Jarraitu argibideak, gehitu etanol absolutuaren bolumen zuzena Buffer RL2 eta Buffer RW2ra eta ondo nahastu kita erabili aurretik.

6. Ehun-laginaren dosia ez da egokia.

Gomendioa: Erabili 10-20 mg ehun edo (1-5) × 10⁶500 μl buffer bakoitzeko zelulak RL1, ehunen gehiegizko erabilerak RNA erauzketa murriztu dezakeelako.

7. Eluzio bolumen desegokia edo eluzio osatugabea.

Gomendioa: arazketa-zutabearen eluzio-bolumena 50-200 μl da;eluzio-efektua egokia ez bada, giro-tenperaturan jartzeko denbora luzatzea gomendatzen da aurrez berotutako RNasarik gabeko ddH gehitu ondoren.₂O, adibidez, 5-10 minutuz.

8.Arazte-zutabeak etanol-hondarrak ditu Buffer RW2 garbitu ondoren.

Gomendioa: Buffer RW2 garbitu ondoren etanol-hondakina badago, hodi hutsaren zentrifugazioa 1min, hodi hutsaren zentrifugazio-eragiketa egiteko denbora 2min arte handitu daiteke, edo arazketa-zutabea giro-tenperaturan jar daiteke 5 minutuz hondar-etanola behar bezala kentzeko.

RNA araztua degradatzen da

ARN araztuaren kalitatea laginaren kontserbazioa, RNasaren kutsadura eta manipulazioa bezalako faktoreekin lotuta dago.

1. Ehun-laginak ez dira garaiz gordetzen.

Gomendioa: bildu ondoren ehun-laginak edo zelulak garaiz erabiltzen ez badira, berehala kriokontserba -80 °C-tan edo nitrogeno likidoan.RNA ateratzeko, erabili hartu berri den ehun edo zelula lagin bat, ahal den guztietan.

2. Ehun-laginak behin eta berriz izoztu-desizoztea.

Gomendioa: Ehun-laginak gordetzean, hobe da zati txikitan moztea kontserbatzeko, eta erabiltzean piezaren bat kentzea, lagina behin eta berriz izozte-desizoztea eta RNA-aren degradazioa ekiditeko.

3. RNase sartzen da edo ez botatzeko eskularruak, maskarak etab.

Gomendioa: RNA erauzteko esperimentuak RNA manipulatzeko gela bereizietan egiten dira eta mahaia esperimentua baino lehen garbitzen da.

Erabili botatzeko eskularruak eta maskarak esperimentuan zehar, RNasa sartzeak eragindako RNA degradazioa minimizatzeko.

4. Erreaktiboak RNasarekin kutsatuta daude erabileran.

Gomendioa: ordezkatu animalien RNA totala isolatzeko kit berri batekin erlazionatutako esperimentuetarako.

5. RNA manipulazioan erabiltzen diren zentrifugatzaile-hodiak, puntak eta abar RNasarekin kutsatuta daude.

Gomendioa: RNA erauzketan erabiltzen diren zentrifugatzaile-hodiak, puntak, pipetak eta abar guztiak RNasik gabekoak direla.

Lortutako RNA araztuak beherako esperimentuei eragiten die

Arazketa-zutabearen bidez araztutako RNAk, gatz ioiak badira, proteina-edukia handiegia bada, beherako esperimentuan eragina izango du, hala nola: alderantzizko transkripzioa, Northern Blot et al.

1. Eluitutako RNAak gatz ioien hondarrak ditu.

Gomendioa: Berretsi etanol bolumen zuzena Buffer RW2-ra gehitu dela eta egin 2 arazketa-zutabe garbiketa funtzionatzeko adierazitako abiadura zentrifugoan;gatz-ioi hondarrik badago, utzi arazteko zutabea Buffer RW2-n 5 minutuz giro-tenperaturan eta egin zentrifugazioa gatz-kutsadura ahalik eta gehien kentzeko.

2. Etanol-hondarra elututako RNAn.

Gomendioa: berretsi buffer RW2 garbitu ondoren, egin hodi hutsaren zentrifugazio-eragiketa funtzionatzeko adierazitako zentrifugazio-abiaduran, handitu hodi hutsaren zentrifugazio-eragiketaren denbora 2 minutura arte oraindik etanol hondarra badago, edo utzi giro-tenperaturan 5 minutuz hodi hutsaren zentrifugazioaren ondoren, ethanolaren hondarra maximizatzeko.

Azido nulzeikoen lagin motak isolatzea

Foregene-ren RNA isolatzeko kitek RNA isolamendu/erauzketa osoa lor dezakete lagin-iturri hauetatik: Animalien ehunak, landareak, zelulak, birikoak, odolak, etab.

Nola gordetzen dut kit-a

Giro-tenperatura gordetzea 24 hilabetez.