• facebook
  • linkedin
  • youtube

Sarrera:

RNA molekulek elkarreragin handia izan dezakete beste molekula biologiko batzuekin, hala nola proteina, DNA eta RNArekin, eta horrela zeluletan eta organismoetan existitzen dira konplexu makromolekularren moduan.Horien artean, RNA-proteina konplexuak RNAren existentzia eta funtzioa dira.RNA pull-down RNA molekulak bahetzeko eta identifikatzeko metodo klasiko bat da, batez ere lncRNA molekulen proteina elkarreragileak, eta ikertzaile gehienek eta nazioarteko aginpidedun aldizkari akademikoek aitortzen dute.Gaur FORREGENE-k zurekin partekatuko ditu RNA pull-down-aren printzipio esperimentala eta prozesu teknikoa, agian erabil dezakezu

1. RNA pull down teknologiaren printzipio esperimentala:

In vitro transkripzioa eta biotinaz markatutako helburuko lncRNA edo lncRNA zatiak (kontrol positibo eta negatibo gisa erabiltzen diren RNA zatiak barne), eta zelula-estraktuekin inkubatu;Erabili avidinarekin ainguratutako ale magnetikoak RNA-proteina edo RNA-RNA konplexuak biltzeko. Garbiketa sakona egin ondoren, konplexua eluten da.LncRNArekin elkarreragiten duen proteina-helburuko molekula detektatzen baduzu, egin proteina-elektroforesia RNA-pull down produktuan, detektatu xede-proteina zilarrezko tindaketaz eta moztu gela masa-espektrometriarako;halaber, zuzenean egin western blot egiaztapena pull-down produktuan;antzematen bada LncRNArekin elkarreragina duten RNA xede-molekulen kasuan, RNA-pull down produktuak RNA erauzketa jasaten dira eta qRT-PCR detekzio espezifikoa egiten da.

2. RNA pull down teknologia esperimentu prozesua:

berria

3. FOREGENE-ren RNA-k behera egiteko zerbitzu teknikoa:

Zelula-kultura

Zelula totala/nuklearra/plasma-proteina-estraktua prestatzea

RNA pull down esperimentua

SDS-PAGE elektroforesia, zilar orbana

Masa espektrometria eta WB esperimentuak

Txosten esperimentala

4. Kasu esperimentala

Hurrengo irudian FJ Bio-Bio-ren RNA-ren beherakada eta SDS-PAGE elektroforesiaren detekzioaren emaitzak erakusten dira, zeinetan gezi gorriak diferentzia-banda markatzen du:

berria 2

Sichuan Unibertsitateko Song Xu irakaslearen ikerketa taldeak epe luzeko 15 urteko metaketa pilatu du lncRNA ikerketaren arloan.Foregene Bio eta Song Xu irakaslearen ikerketa taldeak lankidetzan aritu ziren lncRNA-ren RNA pull down teknologia abiarazteko, eta horrek emaitza onak emango dizkizu zure esperimenturako.


Argitalpenaren ordua: 2021-06-11