Landareen DNA Isolatzeko Kit Genomic Landare DNA Purifikatzeko Kitak Erreaktiboak Protokoloa
Zehaztapenak
50 prestaketa, 100 prestaketa, 250 prestaketa
Kit honek DNA, Foregene proteasa eta buffer sistema berezi bat lotu ditzakeen DNA soilik duen zutabe bat erabiltzen du, eta horrek asko errazten du landareen DNA genomikoaren arazketa.Kalitate handiko DNA genomikoa 30 minututan lor daiteke, eta horrek DNA genomikoaren degradazioa saihesten du.
Bira-zutabean erabiltzen den DNA-soilik silice gel-mintza Foregene-ren material berri paregabea da, DNAri modu eraginkorrean eta zehazki lotu daitekeena, eta RNA, ezpurutasun-proteinak, ioiak, polisakaridoak, polifenolak eta beste konposatu organiko batzuk kentzen dituena.
Produktuaren osagaiak
| Buffer PL1, Buffer PL2 |
| Buffer PW, Buffer WB, Buffer EB |
| Proteasa aurreko genea |
| DNA-Bakarrik Zutabea |
| Argibideak |
Ezaugarriak eta abantailak
■ RNasen kutsadurarik ez: kitak eskaintzen duen DNA-soilik zutabeari esker, DNA genomikotik RNA kentzea ahalbidetzen du esperimentuan zehar RNasa gehigarririk gabe, laborategia RNasa exogenoz kutsatzea eragotziz.
■ Abiadura azkarra: Foregene Proteasak antzeko proteasak baino jarduera handiagoa du eta ehun-laginak azkarrago digeritzen ditu.
■ Sinplea: DNA genomikoaren erauzketa eragiketa 30 minututan burutu daiteke.
■ Erosoa: zentrifugazioa giro-tenperaturan egiten da, ez da 4 ℃ tenperatura baxuko zentrifugazioa edo DNAren etanol hauspeaketa behar.
■ Segurtasuna: ez da erreaktibo organikorik behar.
■ Kalitate handikoa: araztutako DNA genomikoak zati handiak ditu, RNArik, RNasik ez eta ioi-eduki oso baxuak ditu, hainbat esperimenturen eskakizunak bete ditzake.
Kit aplikazioa
Landare-ehun fresko edo izoztuetatik DNA genomikoa erauzteko eta arazteko egokia.
Lan-fluxua
Diagrama
Biltegiratzea eta Iraupena
Kita 12 hilabetez gorde daiteke giro-tenperaturan (15-25 ℃) eta 2-8 ℃ denbora luzeagoan.
Foregene Protease Plus konponbideak formula berezia du, aktiboa dena giro-tenperaturan denbora luzez gordetzen denean (3 hilabete);bere jarduera eta egonkortasuna hobeak izango dira gordetzean4 ℃, beraz, 4 ℃-tan gordetzea gomendatzen da, gogoratu -20 ℃-tan ez gordetzea.
Arazoak aztertzeko gida
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the extraction of plant genomic DNA, hoping to be helpful to your experiments. In addition, for other experimental or technical problems other than operation instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us: 028-83360257 or E-mali: Tech@foregene.com.
Etekin baxua edo DNArik ez
ADN genomikoaren errendimenduan eragina duten faktore asko egon ohi dira, besteak beste, laginaren iturria, laginaren adina, laginaren biltegiratze-baldintzak eta funtzionamendua.
ADN genomikoa ezin izan da erauzketan lortu
1. Ehun-laginak gaizki gordetzen dira edo denbora gehiegiz gordetzen dira, eta ondorioz, DNA genomikoaren degradazioa da.
Gomendioa: Gorde ehun-laginak nitrogeno likidoan edo -20°C;saia zaitez bildu berri diren laginak erabiltzen DNA genomikoaren erauzketarako.
2. Lagin-kopuru gutxiegiak dagokion DNA genomikoa ez ateratzea eragin dezake.
Iradokizuna: denbora luzez gordeta egon diren edo DNA genomikoaren degradazio larria duten ehun-laginetarako, ehun-lagin kopurua egoki handitu daiteke DNA genomiko handia ateratzeko.Laginaren kopurua DNAren beharren arabera zehaztu daiteke, baina lagin freskoak ez du 100 mg baino gehiago izan behar eta lagin lehorrak ez du 30 mg baino gehiago izan behar.
3. Lagina ez da nitrogeno likidoarekin ehotzen edo denbora gehiegi jartzen nitrogeno likidoaren ondoren.
Iradokizuna: DNA erauzketan, lagina nitrogeno likidoarekin guztiz xehatu behar da zelula horma hausteko;Arteztu ondoren, transferitu lagin-hautsa 65-tan aurrez berotutako PL1ra°C ahalik eta azkarren (lur hautsa urtu ondoren, DNA genomikoa azkar degradatzen hasiko da) .
4. Foregene Proteasa desegoki biltegiratzea jarduera murriztua edo desaktibatua dakar.
Gomendioa: berretsi Foregene Proteasa gordetzeko baldintzak edo ordezkatu Foregene Proteasa berri batekin hidrolisi entzimatikorako.
5. Kita gaizki gordeta edo denbora gehiegiz gordetzen da, eta horrek kitaren osagai batzuk huts egiten ditu.
Gomendioa: Erosi landareen DNA genomikoaren erauzketa-kit berri bat erlazionatutako eragiketetarako.
6. Kitaren erabilera desegokia.
Iradokizuna: Erosi landare-DNA isolatzeko kit bat landare-DNA genomikoa ateratzeko eta arazteko laginei eskainitakoa.
7. Buffer WB a gehitu gabenhidroa etanola.
Gomendioa: Ziurtatu Buffer WB-ri etanol absolutuaren bolumen zuzena gehitzen duzula.
8. Eluiatzailea ez zen behar bezala isuri silize-mintzara.
Iradokizuna: Gehitu aurrez berotutako elutzailea 65-tan℃tantaka silize gel mintzaren erdialdera, eta utzi giro-tenperaturan 5 minutuz eluzioaren eraginkortasuna areagotzeko.
Errendimendu baxuko DNA genomikoa lortzeko erauzketa
1. Lagina gaizki gordetzen da edo denbora gehiegiz gordetzen da, eta ondorioz, DNA genomikoaren degradazioa da.
Gomendioa: Gorde ehun-laginak -20-tan℃;saia zaitez bildu berriak diren ehun-laginak DNA genomikoa erauzteko erabiltzen.
2. Ehun-lagin kopurua txikiegia bada, ateratako DNA genomikoa txikiagoa izango da.
Iradokizuna: landare-lagin batzuk uretan aberatsak dira, hala nola, uretako landareak, hala nola algak, etab., dosia egoki handitu daiteke edo ura pixka bat deshidratatu daiteke ebakuntza egin baino lehen.
3. Laginak ez ziren nitrogeno likidoarekin ondo ehotzen edo giro-tenperaturan utzi ziren ehotu ondoren denbora gehiegiz.
Iradokizuna: nitrogeno likidoaren artezketa nahikoa izan behar da, eta laginaren zelula horma ahalik eta gehien hautsi behar da;artezketa egin eta berehala, lagin-hautsa 65era eraman behar da℃Aurrez berotutako Buffer PL1 hurrengo urratserako.
4. Kit egokia ez erabiltzea.
Gomendioa: Erabili landareen DNA isolatzeko kit dedikatu bat landareen DNA genomikoa ateratzeko eta arazteko.
5. Foregene Proteasa desegoki biltegiratzea jarduera murriztua edo desaktibatua dakar.
Gomendioa: berretsi Foregene Proteasa gordetzeko baldintzak edo ordezkatu Foregene Proteasa berri batekin hidrolisi entzimatikorako.
6. Eluenteen arazoa
Gomendioa: Erabili Buffer EB eluzioa egiteko;ddH erabiliz gero2O edo beste eluente batzuk, ziurtatu eluentearen pHa 7,0-8,5 artean dagoela.
7. Eluentea ez da behar bezala isurtzen
Iradokizuna: Gehitu eluzio-tanta silize-mintzaren erdian eta utzi giro-tenperaturan 5 minutuz eluzioaren eraginkortasuna areagotzeko.
8. Eluentearen bolumena txikiegia da
Iradokizuna: Erabili eluiatzailea DNA genomikoaren eluzioa egiteko argibideen arabera, gutxienez 100 baino gutxiago.μl.
Apurtasun baxuko DNA genomikoa ateratakoa
DNA genomikoaren garbitasun baxuak beheranzko esperimentuen porrota edo efektu txarra ekarriko du, hala nola: entzima ezin da moztu, eta xede-genearen zatia ezin da PCR bidez lortu.
1. Askotariko proteina kutsadura, RNA kutsadura.
Analisia: Buffer PW ez zen erabili zutabea garbitzeko;Buffer PW ez zen erabili zutabea zentrifugazio abiadura egokian garbitzeko.
Iradokizuna: gainnadantea zutabetik igarotzean prezipitaziorik ez dagoela ziurtatzen saiatu;ziurtatu arazte-zutabea Buffer PW-rekin garbitzen duzula argibideen arabera, eta urrats hau ezin da baztertu.
2. Ioien kutsadura kutsadura.
Analisia: Buffer WB garbiketa-zutabea baztertu edo behin bakarrik garbitu zen, eta ondorioz, hondar kutsadura ionikoa sortu zen.
Gomendioa: Ziurtatu birritan garbitu Buffer WBrekin argibideen arabera hondar ioiak ahalik eta gehien kentzeko.
3. RNasen kutsadura.
Analisia: RNasa exogenoa Bufferra gehitzen da;Buffer PWn garbiketa-eragiketa okerrak hondar RNasa eragingo du eta beheranzko RNAren eragiketa esperimentaletan eragina izango du, in vitro transkripzioa adibidez.
Iradokizuna: Foregene serieko azido nukleikoak erauzteko kitek RNA ken dezakete RNasa gehigarririk gabe, eta Landareen DNA Isolation Kit-eko erreaktibo guztiek ez dute RNasa behar;ziurtatu garbiketa-zutabea Buffer PW-rekin argibideen arabera garbitzen duzula, eta urrats hau ezin da baztertu.
4. Etanol-hondarrak.
Analisia: arazketa-zutabea Buffer WBrekin garbitu ondoren, ez zen hodi hutsik zentrifugaziorik egin.
Gomendioa: jarraitu hodi hutsak zentrifugatzeko argibideak.
Argibide eskuliburua:
Landareen DNA Isolatzeko Kitaren Argibide Eskuliburua
