• facebook
  • linkedin
  • youtube
orri_bandera

Landareen RNA osoa isolatzeko kit gehi RNA totalaren arazketarako kit polisakarido eta polifenoletan aberatsak diren landareentzako

Kitaren deskribapena:

 

Kat.Zk.RE-05021/05022/05024

 

Polisakarido eta polifenol osagai altuak dituzten landare-lagin orokorretatik RNA osoa arazteko.

Azkar atera kalitate handiko RNA totala landare-laginetatik polisakarido eta polifenol eduki handia dutenak.

RNasarik gabeko DNA garbitzeko zutabea erabiliz

Sinplea: eragiketa guztiak giro-tenperaturan egiten dira

Azkar: eragiketa 30 minututan burutu daiteke

Segurua: ez da erreaktibo organikorik erabiltzen aurreko indarra


Produktuaren xehetasuna

Produktuen etiketak

ohiko galderak

BALIABIDEAK DESKARGATU

Zehaztapenak

50 prestaketa, 200 prestaketa

Kitak Foregene-k garatutako spin zutabea eta formula erabiltzen ditu, polisakarido edo polifenol eduki handiko landare-ehunetatik garbitasun handiko eta kalitate handiko RNA osoa modu eraginkorrean ateratzeko.DNA-Garbiketa zutabea eskaintzen du, DNA genomikoa erraz kendu dezakeen gainditzailetik eta ehun-lisatutik.RNA soilik duen zutabeak RNA modu eraginkorrean lotu dezake.Kitak lagin kopuru handia prozesatu dezake aldi berean.

Sistema osoak ez du RNasarik, beraz, RNA araztua ez da degradatuko.Buffer PRW1 eta Buffer PRW2 lortutako RNA proteina, DNA, ioi eta konposatu organikoek kutsatuta ez dagoela ziurta dezakete.

Kitaren osagaiak

Buffer PSL1, Buffer PS, Buffer PSL2

Buffer PRW1, Buffer PRW2

RNasirik gabeko ddH2O, DNA-garbiketa zutabea

RNA-bakarrik zutabea

Ezaugarriak eta abantailak

■ Funtzionamendua giro-tenperaturan (15-25 ℃) prozesu osoan zehar, izotz-bainurik gabe eta tenperatura baxuko zentrifugaziorik gabe.
■ Kit osoa RNasirik gabekoa, ez dago RNA degradazioaz kezkatu beharrik.
■ Bereziki egokia polisakaridoen eta polifenolen landare-laginetako RNA arazteko.
■ DNA garbitzeko zutabea DNArekin lotzen da bereziki, kitak DNA genomikoaren kutsadura ken dezan DNasa gehitu gabe.
■ RNA etekin handia: RNA soilik Zutabeak eta formula bakarrak RNA eraginkortasunez araz dezakete.
■ Abiadura azkarra: funtzionatzeko erraza eta 30 minutuko epean osa daiteke.
■ Segurtasuna: ez da erreaktibo organikorik behar.
■ Kalitate handikoa: araztutako RNA zatiak garbitasun handikoak dira, proteinarik eta beste ezpurutasunik gabe, eta beheranzko hainbat aplikazio esperimental bete ditzakete.

Produktuaren parametroak

■ Beheko aplikazioak: lehen katearen cDNA sintesia, RT-PCR, klonazio molekularra, Northern Blot, etab.
■ Lagina: polisakaridoen eta polifenolen landare-ehun freskoak edo izoztuak
■ Dosia: 50mg landare-ehuna
■ Arazketa-zutabearen RNA lotzeko ahalmen maximoa: 80 μg
■ Eluzio bolumena: 50-200 μl

Kit aplikazioa

Polisakarido eta polifenol eduki handia duten landare-ehun fresko edo izoztutako landare-ehunetatik (batez ere landare-hosto-ehun freskoetatik) RNA osoa erauzteko eta arazteko egokia da.

Lan-fluxua

landare osoa RNA-lan-fluxu sinplea

Diagrama

Landare Guztira RNA Isolatzeko Kit Plus 6

Plant Total RNA Isolation Kit Plus-ek 50 mg polisakaridoen eta polifenolen hosto fresko prozesatu zituen, eta % 5 araztutako RNA elektroforesiaren bidez probatu zen.
1: Banana
2: Ginkgo
3: Kotoia
4: Granada

Biltegiratzea eta Iraupena

Kit hau 24 hilabetez gorde daiteke giro-tenperaturan (15-25 ℃) baldintza lehorretan;denbora luzeagoan gorde behar bada, 2-8 ℃-tan gorde daiteke.
Buffer PSL1 4 ℃-tan jar daiteke β-mercaptoetanola gehitu ondoren hilabetez (esperimentuaren une berean gehitzea gomendatzen da).


  • Aurrekoa:
  • Hurrengoa:

  • Zutabea entxufatuta

    Zutabea entxufatu ondoren, RNA etekina murrizten da edo ezinezkoa da RNA arazteko, eta lortutako RNA masa txikia da.

    Kausa arrunten azterketa:

    1. Lagin-hausteak ez dira sakonak.

    Laginaren hausturak ez du DNA-GARBIKETAKO ZUTAPEA erabat blokeatzea eragiten, RNAren errendimendua eta kalitatea eragiten duen bitartean.Laginak hautsi dituzunean ehotzeko eragiketa azkarra gomendatzen dugu nitrogeno likido nahikoan.Poliol polisakaridoen landare-laginetarako, Plant Total RNA ISOLATION KIT PLUS erabiltzea gomendatzen dugu.

    2. Banatutako laginaren gainnadantea DNA-garbiketa zutabearekin xurgatzean, litekeena da zelula zatitutako hauspeatua arnastea.

    Hartutako zelulen zatikako sedimentuek ARN BAKARRIZKO Zutabea eragingo dute, RNA xurgatzeko eragiketa egiten denean blokeatuko dena (ikus 6. urratsa).Gaingatzaile hori xurgatzean kontu handiz gomendatzen dugu, zelula-hondakinak zurrupatu ez daitezen.

    3. Laginaren hasierako zenbatekoa gehiegi da.

    Gehiegizko laginak erabiltzeak Buffer PSL1-ek laginaren zatiketa osatugabea edo zelula-lisia osatugabea eragingo du, eta, ondorioz, arazketa-zutabea blokeatu egingo da araztean.Landare Guztira RNA isolatzeko kit lagin operatibo araztutako bakoitza 50 mg-koa da.Poliol polisakaridoen landare laginetarako, Plant Total RNA ISOLATION KIT PLUS probatzea gomendatzen dizugu.

    4. Zentrifugatzailearen tenperatura baxuegia da.

    RNA isolatzeko eta arazteko prozesu osoa giro-tenperaturan egiten da (20-25°C), lagin-ehuna nitrogeno likidoak hautsi duela izan ezik. Zentrifugatzaile kriogeniko batzuen tenperatura 20 baino txikiagoa da., DNA garbitzeko zutabea eta/edo RNA soilik zutabea blokeatzea eragin dezake.Hori gertatzen bada, ezarri zentrifugatzailearen tenperatura 20-25, etaziurtatu lisi-nahasketa eta/edo etanol-gehitutako gainditzailea aurrez berotu dela 37°C.

    Ez da RNA ateratzen edo RNA etekin baxua da

    Berreskuratze-eraginkortasunean eragina duten faktore asko izan ohi dira, hala nola: laginaren RNA edukia, eragiketa-metodoa, eluzio-bolumena, etab.

    Arrazoi arrunten analisia honako hau da:

    1.Izotz-bainua edo tenperatura baxuko (4°C) zentrifugazioa egin zen operazioan.

    Iradokizuna: funtzionatu giro-tenperaturan (15-25°C) prozesu osoan, ez egin izotz-bainua eta tenperatura baxuko zentrifugazioa.

    2.ARNa degradatu egin da laginaren kontserbazio desegokiagatik edo lagina epe luzerako kontserbatzeagatik.

    Gomendioa: Bildutako laginak azkar izoztu behar dira nitrogeno likidoan, eta gero -80 °C-tan gorde behar dira denbora luzez, saihestu laginak behin eta berriz izoztea eta desizoztea;edo berehala busti laginak RNA egonkortzaile RNAlater disoluzioan (animalien laginak).

    3.Laginaren zatiketa eta lisis nahikorik ezak arazketa-zutabea blokeatzea dakar.

    Iradokizuna: Ehuna ehotzean, ziurtatu ehuna nahikoa ehotuta dagoela eta azkar transferitu aurrez prestatutako Buffer PSL1ra (berretsi β-ME proportzio egokia gehitu dela, ikusi prozeduraren 1. urratsa).

    4.Eluentea gaizki gehitu da.

    Iradokizuna: Ziurtatu RNase-Free ddH2O arazketa-zutabearen mintzaren erdialdera isurtzen dela.

    5.Etanol absolutuaren bolumen zuzena ez zen Buffer PSL2 edo Buffer PRW2ra gehitu.

    Iradokizuna: jarraitu argibideak, gehitu etanol absolutuaren bolumen zuzena Buffer PSL2 eta Buffer PRW2 eta ondo nahastu kita erabili aurretik.

    6.Ehun-lagin kopurua desegokia da.

    Iradokizuna: Erabili 50 mg ehun Buffer PSL1 500 μl bakoitzeko.Ehun gehiegi erabiltzeak ateratako RNA-kopurua murriztuko du eta ondoriozko RNA-ren purutasuna ere murriztuko da.Gomendatzen dugu hasierako laginaren dosiak 50 mg baino gehiago ez izatea RNA erauzteko eragiketa bakoitzeko.

    7.Eluzio bolumen desegokia edo eluzio osatugabea.

    Iradokizuna: arazte-zutabearen eluente-bolumena 50-200 μl da;eluzio-efektua asegarria ez bada, denbora giro-tenperaturan luzatzea gomendatzen da RNasarik gabeko ddH2O berotua gehitu ondoren, adibidez, 5-10min.

    8.Arazte-zutabeak etanol-hondarrak ditu BufferPRW2-rekin garbitu ondoren.

    Iradokizuna: Hodi hutsa 1 minutuz zentrifugatzen bada eta Buffer PRW2-n garbitu ondoren oraindik etanola geratzen bada, hodi hutsaren zentrifugazioaren denbora 2 minutura handitu dezakezu, edo arazte-zutabea giro-tenperaturan jarri 5 minutuz, hondar-etanola guztiz kentzeko.

    9.Kit-a gaizki erabili zen.

    Iradokizuna: polisakarido polifenolikoen landare-laginetarako, baliteke ohiko kitak erabiliz, hala nola Plant Total RNA Isolation Kit-a, agian ezin izatea RNA lagin idealak lortu.Plant Total RNA IsolationKit Plus erabiltzea gomendatzen dizugu, polisakarido polifenolikoen landare-laginetarako bereziki diseinatuta dagoena.Polifenol eta polisakarido landareen laginetatik RNA ateratzeko bereziki garatutako kit bat.

    OD260/OD280 balioa baxua da

    RNA eluzioa ddH2O-rekin eta espektrofotometroaren irakurketetarako erabiltzen den OD260/OD280 balio baxuak eragiten ditu.10 mM Tris-HCl, pH 7,5 erabiltzea gomendatzen dugu (ARNasarik gabeko ddH2O RNA elusteko baino) OD260/OD280 balio nahiko zuzenak lortzeko, ikus "ARNaren kontzentrazio eta arazketa saiakuntzak" 19. orrialdean.

    ARN araztua degradatzen da

    RNA araztuaren kalitatea laginaren kontserbazioa, RNasaren kutsadura eta manipulazioa bezalako faktoreekin lotuta dago.

    Arrazoi arrunten analisia:

    1.Ehunen laginak ez ziren bildu ondoren denboran gorde.

    Gomendioa: Ehun-laginak bildu ondoren garaiz erabiltzen ez badira, gorde itzazu nitrogeno likidoan tenperatura baxuan edo transferitu -80 °C-ra epe luzerako gordetzeko, nitrogeno likidoan azkar izoztu ondoren, edo berehala murgildu laginak RNA egonkortzaile RNAlater soluzioan (animalien laginak).RNA erauzteko, saiatu bildu berri diren ehun laginak erabiltzen.

    2.Ehun laginak behin eta berriz izoztea eta desizoztea.

    Iradokizuna: ehun-laginak gordetzean, hobe da zati txikitan moztea, kontserbatzeko, eta haietako zati bat ateratzea erabiltzean, laginak behin eta berriz izozteak eta desizozteak eragindako RNA-ren degradazioa saihesteko.

    3.RNasa ebakuntza gelan sartzen da edo erabili gabeko eskularruak, maskarak, etab.

    Iradokizuna: RNA erauzteko esperimentuak RNA eragiketa bereizietan egiten dira hobekien, eta laborategiko mahaia garbitu behar da esperimentua baino lehen, eta botatzeko eskularruak eta maskarak eraman behar dira esperimentuan zehar, RNasa sartzeak eragindako RNA degradazioa neurri handienean saihesteko.

    4.Erreaktiboa RNasak kutsatzen du erabileran zehar.

    Iradokizuna: ordeztu landareen guztizko RNA erauzteko kit-serie berri batekin erlazionatutako esperimentuetarako.

    5. RNA manipulatzeko erabiltzen diren zentrifuga-hodiak eta pipeta-puntak RNasarekin kutsatuta daude.

    Iradokizuna: Ziurtatu RNA erauzketan erabiltzen diren zentrifuga-hodiak, pipeta-puntak, pipetak eta abar guztiak RNasik gabekoak direla.

    Argibide eskuliburuak:

    Plant Total RNA Isolation Kit Plus Argibide Eskuliburua

     

    Idatzi zure mezua hemen eta bidali iezaguzu