• facebook
  • linkedin
  • youtube
orri_bandera

Denbora errealeko PCR Easyᵀᴹ-Taqman

Kitaren deskribapena:

Sinplea: 2 × PCR Mix errore esperimentala eta eragiketa denbora murrizteko

Espezifikoak: tapoi optimizatuak eta abiarazte beroko Taq entzimak anplifikazio ez-espezifikoa eta primer dimeroen sorrera ekidin ditzake.

Sentsibilitate handia: txantiloiaren kopia baxuak hauteman ditzake

Aldakortasun ona: denbora errealeko PCR tresna kuantitatibo gehienekin bateragarria

aurreko indarra


Produktuaren xehetasuna

Produktuen etiketak

ohiko galderak

Kitaren deskribapenak

2X Real PCR ErrazaTMMix-Taqman Real Time PCR Easy-k emandakoaTM-Taqman kit aurrenahasketa sistema berri bat da, denbora errealeko PCR anplifikazio erreakzioetarako zunda fluoreszente espezifikoak erabiltzen dituena, produktuaren espezifikotasuna eta erreakzioaren sentikortasuna asko hobetu ditzakeena.ROX barne-kontroleko koloratzaile gisa eskaintzen da.

2X Benetako PCR ErrazaTMMix-Taqman-ek Foregene-ren Taq DNA Polimerasa abiarazte berezia dauka.Taq entzima arruntekin alderatuta, anplifikazio-eraginkortasun handiko abantailak ditu, anplifikazio espezifikoko gaitasun sendoa eta desegokitze-tasa baxuaren abantailak ditu.Anplifikazio ez-espezifikoa murriztu dezake eta PCRren zehaztasuna hobetu dezake.

Zehaztapenak

Denbora errealeko PCR errazaTM-Taqman

Kitaren konposizioa (20μl sistema)

QP-01021

QP-01022

QP-01023

QP-01024

200T

500T

1000T

2000T

Benetako PCRErrazaTMNahastu-Taqman

1 ml ×2

1.7 ml ×3

1.7 ml ×6

1.7 ml ×12

20×ROX erreferentziako tindagaia

200 μl

0,5ml

1 ml

1 ml × 2

DNasirik gabeko ddH2O

1,7 ml

1.7 ml ×2

10 ml

20 ml

Ineraikuntza

1

1

1

1

Ezaugarriak eta abantailak

■ Sinplea: 2X PCR nahasketa errore esperimentala eta funtzionamendu denbora murrizteko

■ Espezifikoak: tapoi optimizatuak eta abiarazte beroko Taq entzimak anplifikazio ez-espezifikoa eta hasierako dimeroen sorrera ekidin ditzake.

■ Sentikortasun handia: txantiloiaren kopia baxuak hauteman ditzake

■ Aldakortasun ona: denbora errealeko PCR kuantitatiboko tresna gehienekin bateragarria

Kit aplikazioa

qPCR azterketa

Lan-fluxua

RT PCR-Taqman
RT PCR-Taqman grafikoa

Grafikoa

Biltegiratzea eta iraupena

Kit hau argitik urrun gorde behar da eta -20 ℃-tan gorde behar da.Maiz erabiltzen bada, 4 ℃-tan ere gorde daiteke denbora laburrean (10 egun).


  • Aurrekoa:
  • Hurrengoa:

  • Anplifikazio seinalerik ez

    1.Kitaren Taq DNA Polimerasak bere jarduera galtzen du kitaren biltegiratze desegokiagatik edo iraungitzeagatik.
    Gomendioa: berretsi kitaren biltegiratze-baldintzak;gehitu berriro Taq DNA polimerasa kopuru egoki bat PCR sistemara edo erosi denbora errealeko PCR kit berri bat erlazionatutako esperimentuetarako.

    2.ADN txantiloian Taq DNA Polimerasaren inhibitzaile asko daude.
    Iradokizuna: txantiloia birraztu edo erabilitako txantiloi kopurua murriztu.

    3.Mg2+ kontzentrazioa ez da egokia.
    Gomendioa: eskaintzen dugun 2× Real PCR Mixaren Mg2+ kontzentrazioa 3,5 mM da.Hala ere, lehen eta txantiloi berezi batzuetarako, Mg2+ kontzentrazioa handiagoa izan daiteke.Hori dela eta, zuzenean MgCl2 gehi dezakezu Mg2+ kontzentrazioa optimizatzeko.Optimizatzeko aldi bakoitzean Mg2+ 0.5mM handitzea gomendatzen da.

    4.PCR anplifikazio-baldintzak ez dira egokiak, eta primer-sekuentzia edo kontzentrazioa desegokia da.
    Iradokizuna: berretsi abiarazlearen sekuentziaren zuzena eta abiarazlea ez dela degradatu;anplifikazio-seinalea ona ez bada, saiatu erretiro-tenperatura jaisten eta lehen-kontzentrazioa egoki egokitzen.

    5. Txantiloi kopurua gutxi edo gehiegi da.
    Gomendioa: Egin txantiloiaren linealizazio-gradientearen diluzioa eta hautatu denbora errealeko PCR esperimenturako PCR efektu onena duen txantiloiaren kontzentrazioa.

    NTC fluoreszentzia balio handiegia du

    1.Erreaktiboen kutsadura funtzionamenduan eragindakoa.
    Gomendioa: Ordeztu denbora errealeko PCR esperimentuetarako erreaktibo berriekin.

    2.PCR erreakzio-sistema prestatzerakoan kutsadura gertatu da.
    Gomendioa: Hartu behar diren babes-neurriak funtzionatzerakoan, hala nola: latexezko eskularruak jantzita, iragazkidun pipeta-punta erabiltzea, etab.

    3.Primerak degradatu egiten dira, eta abiarazleak degradatzeak anplifikazio ez-espezifikoa eragingo du.
    Iradokizuna: Erabili SDS-PAGE elektroforesia abiarazleak degradatuta dauden ala ez detektatzeko, eta ordeztu lehengai berriekin Denbora errealeko PCR esperimentuetarako.

    Primer dimeroa edo anplifikazio ez-espezifikoa

    1.Mg2+ kontzentrazioa ez da egokia.
    Gomendioa: eskaintzen dugun 2× Real PCR EasyTM Mixaren Mg2+ kontzentrazioa 3,5 mM da.Hala ere, lehen eta txantiloi berezi batzuetarako, Mg2+ kontzentrazioa handiagoa izan daiteke.Hori dela eta, zuzenean MgCl2 gehi dezakezu Mg2+ kontzentrazioa optimizatzeko.Optimizatzeko aldi bakoitzean Mg2+ 0.5mM handitzea gomendatzen da.

    2.PCR annealing tenperatura baxuegia da.
    Iradokizuna: handitu PCR errekostatzeko tenperatura 1 ℃ edo 2 ℃ bakoitzean.

    3.PCR produktua luzeegia da.
    Gomendioa: Denbora errealeko PCR produktuaren iraupena 100-150 bp artekoa izan behar du, ez 500 bp baino gehiago.

    4.Primerak degradatu egiten dira, eta abiarazleen degradazioak anplifikazio espezifikoa agertzea ekarriko du.
    Iradokizuna: Erabili SDS-PAGE elektroforesia abiarazleak degradatuta dauden ala ez detektatzeko, eta ordeztu lehengai berriekin Denbora errealeko PCR esperimentuetarako.

    5.PCR sistema desegokia da, edo sistema txikiegia da.
    Iradokizuna: PCR erreakzio-sistema txikiegia izateak detekzio-zehaztasuna gutxituko du.Hobe da PCR kuantitatiboko tresnak gomendatutako erreakzio-sistema erabiltzea Real Time PCR esperimentua berriro exekutatzeko.

    Balio kuantitatiboen errepikakortasun eskasa

    1. Tresna gaizki funtzionatzen ari da.
    Iradokizuna: akatsak egon daitezke tresnaren PCR zulo bakoitzaren artean, tenperaturaren kudeaketan edo detekzioan erreproduzigarritasun eskasa eraginez.Mesedez, egiaztatu dagokion tresnaren argibideen arabera.

    2.Laginaren garbitasuna ez da ona.
    Gomendioa: lagin ezgabeek esperimentuaren erreproduzigarritasun eskasa ekarriko dute, txantiloiaren eta lehengaien purutasuna barne.Hobe da txantiloia birraztea, eta lehengaiak SDS-PAGE bidez garbitzen dira.

    3.PCR sistema prestatzeko eta biltegiratzeko denbora luzeegia da.
    Iradokizuna: Erabili denbora errealeko PCR sistema PCR esperimenturako prestatu eta berehala, eta ez utzi denbora luzez alde batera utzita.

    4.PCR anplifikazio-baldintzak ez dira egokiak, eta primer-sekuentzia edo kontzentrazioa desegokia da.
    Iradokizuna: berretsi abiarazlearen sekuentziaren zuzena eta abiarazlea ez dela degradatu;anplifikazio-seinalea ona ez bada, saiatu erretiro-tenperatura jaisten eta lehen-kontzentrazioa egoki egokitzen.

    5.PCR sistema desegokia da, edo sistema txikiegia da.
    Iradokizuna: PCR erreakzio-sistema txikiegia izateak detekzio-zehaztasuna gutxituko du.Hobe da PCR kuantitatiboko tresnak gomendatutako erreakzio-sistema erabiltzea Real Time PCR esperimentua berriro exekutatzeko.

    Idatzi zure mezua hemen eta bidali iezaguzu