Oraindik Trizol erabiltzen al duzu RNA ateratzeko?
Aupa, ez nazazu zure osasunaz kezkatzen!
Trizol marjinatzear dago, ez didazu oraindik ilunpean zaudela esan?

Trizol erreaktiboaren osagai nagusia fenola da, eta eragiketa esperimentalean kloroformoa bezalako erreaktibo organikoak ere gehitzen dira.Epe luzeko esposizioak zure osasunari kalte egingo dio, batez ere larruazaleko kontaktu zuzenak erredura kimiko larriak eta orbain iraunkorrak eragin ditzake.

Egoera normalean, laborategiko kideek arriskuak murrizten dituzte guztiz armatuz (laborategiko batak, eskularruak eta maskarak jantzita).

Eta nire aholkua hauxe da: mesedez ordezkatu Trizol zuzenean iturritik kalteak saihesteko.

1. RNA erauzteko lehen belaunaldiko produktua
1987an atera (Trizol erreaktiboak)

abantaila:
Erauzketa osoagoa

Desabantailak:
Erreaktibo toxikoak behar dira, hala nola guanidina isotiozianato-fenol-kloroformoa;
Eragiketa astuna;
ADN kutsadura kentzeko DNasa erabili behar da

2.ARNa erauzteko bigarren belaunaldiko produktua
1994an atera (QIAGEN RNeasy eta etxeko produktu gehienak)

abantaila:
Zutabe zentrifugoaren metodoa hartzen da, funtzionatzeko erraza dena;

Desabantaila:
Zentrifugatu behar da ehun-hondakinak kentzeko
ADN kutsadura kentzeko DNasa erabili behar da

3.RNA erauzteko hirugarren belaunaldiko produktua
2005ean atera zen (QIAGEN RNeasy Plus eta ForegenoaRNA arazketa serieko produktuak)

abantaila:
Zuzenean erabili DNA kentzeko zutabea DNA eta ehun-hondakinak aldi berean kentzeko, denbora eta esfortzua aurreztuz;
Seguru eta erosoa, ez da iragazkia zutabea eta DNasa gehitu behar ezpurutasunak erraz kentzeko eta DNA kutsatzea saihesteko

Ikus ditzagun RNA erauzketako lehen belaunaldiko produktuaren (Trizol), bigarren belaunaldiko produktuaren (RNeasy) eta hirugarren belaunaldiko produktuaren (Foregene) arteko desberdintasun operatiboak:

Irudiko funtzionamendua argia da: hirugarren belaunaldiko produktuak abantaila nabariak ditu

Hiru hitz besterik ez deskribatzeko: erraza!Azkar!Segurtasuna

Emaitza esperimentalen PK diagramarentzatRNA erauzketako lehen belaunaldiko, bigarren belaunaldiko eta hirugarren belaunaldiko produktuak:

1. Eelektroforetograma

Lehenengo belaunaldia (1: Trizol)
Bigarren belaunaldia (2:QIAGEN Erraz)
Hirugarren belaunaldia (3: QIAGEN RNeasy plus, 4: Foregene)

Nolako produktua ona den, konparazio bidez jakingo duzu
Foregene kitaren bidez ateratako RNA
Kontzentrazio handia ez ezik, osotasun ona ere bada

2.qPCR grafikoa (anplifikazio kurba grafikoa)

Lehenengo belaunaldia (Trizol)

Bigarren belaunaldia (zeru urdinaesan nahi duQIAGEN RNeasy-, gorriaesan nahi duQIAGEN RNeasy +)

Hirugarren belaunaldia (urdinak Foregene esan nahi du, berdeak QIAGEN RNeasy plus esan nahi du)

(Oharra: bigarren belaunaldiko QIAGEN RNeasy qPCR grafikoak esan nahi du kitak ez duela DNasa gehitzen eta ez duela DNAren kutsadura kentzen. Horregatik, CT handiagoa da eta emaitza ez da zehatza; QIAGEN RNeasy + esan nahi du DNasa gehitu dela eta DNA kutsadura kendu dela, eta emaitza zehatza da)

Elektroforetograma edo PCR anplifikazio kurba grafiko kuantitatiboa den ala ez, Foregene produktuen kalitatea ez da atzerriko inportatutako produktuen aldean.