W: Anaia, alderantzizko transkripzioa amaitu da, eta azkenik azken urratsa - PCR kuantitatibo fluoreszentea!Aizu, anaia, zer da denbora errealeko PCR kuantitatiboa?
M: PCR beti dakizu, ezta?
W: Badakizu, PCR polimerasaren kate-erreakzioa da, eta DNA handitzen duen teknologia da!
M: Ia da... Helburu-sekuentzia milioi bat aldiz baino gehiagotan anplifikatzeko metodo teknikoa da abiarazle espezifikoen bidez, baina honek helburu-sekuentziaren presentzia edo eza adierazten du soilik, eta ezin du zehaztu hasierako txantiloiaren zenbatekoa.Fluoreszentziaren PCR kuantitatiboa arazo hori konpontzeko garatutako metodo teknikoa da.Denbora errealeko PCR eta Quantity PCR (qPCR) orokorrean aipatzen dira.
W: PCR arruntarekiko aldea fluoreszentzia kuantifikazioan dago?
M: Bai, hau da, PCR ziklo bakoitzaren luzapen-etapan, fluoreszentzia-seinalearen intentsitatea detektatzen da, eta hasierako txantiloiaren zenbatekoa seinalearen intentsitatearen aldaketaren arabera kalkula daiteke.
W: Hain konplikatua sentitzen da!Nik neuk kalkulatu behar al dut hori?
M: Honek poliki-poliki ikastea eskatzen du, hobe da printzipioa ulertzeko gai izatea.Orain CT balioan zentratu zaitezke lehenik, hau da, datu esperimental nahiko intuitiboak dira, eta bere tamaina hasierako txantiloiaren zenbatekoaren tamainari dagokio.Anplifikazio kurbak eta urtze kurbak bezalako grafikoak ere badaude.Azken hitza dute zure esperimentua arrakastatsua den ala ez.
W: Oh, anaia.Orduan qPCR esperimentua egingo dut!
M: Arreta berezia jarri erreaktiboen eremuan txantiloiak ez gehitzeko, bestela erabili gabeko nahasketa erraz kutsatuko da!
W: Ados!

Denbora errealeko PCR Easyᵀᴹ-SYBR Green I Kit

Eraginkortasun handiagoa, espezifikotasun handiagoa
Sentsibilitate handia, bateragarritasun ona