Hot-start Taq entzima oso erabilia da.ADN polimerasa arruntarekin alderatuta, abiarazte beroko Taq entzimak eraginkortasunez ekidin dezake anplifikazio ez-espezifikoa eta primer dimeroen eraketa, eta helburu-genearen anplifikazioaren arrakasta-tasa eraginkortasunez hobe dezake.Batez ere, proba genetikoen arloan, abiarazte beroko Taq entzima derrigorrezko estandar gisa identifikatu da industrian, eta DNA polimerasa arrunta ez da erabili behar.Goian ikusten denez, abiarazte beroko Taq entzimak oso erabiliak dira.Gaur egun, hasierako Taq entzimen marka asko daude barne-merkatuan, baina ez dago kalitate handiko Taq entzimak.Taq entzimaren hasierako hainbeste produkturen aurrean, nola aukeratu behar dugu?

1. Hautatu beroan abiarazteko Taq entzima anplifikazio eraginkortasun handikoa

PCR anplifikazioaren eraginkortasuna Taq entzimaren errendimenduarekin oso lotuta dago.Taq entzimaren erreakzio-sistema on bat optimizatu ondoren, anplifikazio-eraginkortasuna % 95etik gorakoa da eta hasierako txantiloi-kopuruaren anplifikazio-tartea zabala da.Xede-genearen edukia baxua denean lor daiteke anplifikazio asegarria, eta ez da erraza txantiloi-kopurua handia denean pozoitzea eta anplifikazio esponentzialaren epea luzea denean.Errendimendu eskasa duen Taq entzimarentzat, erreakzio-sistema askotan optimizatu bada ere, anplifikazioaren eraginkortasuna % 90 baino txikiagoa da oraindik, anplifikazio-kurbaren "S" forma ez da nabaria, malda txikia da eta kurba laua da.Txantiloi kopurua txikia denean, ezin da anplifikatu, eta txantiloi kopurua handia denean, anplifikazio efektua ez da egokia.Hori dela eta, anplifikazio-eraginkortasun handiko DNA polimerasak hautatzea funtsezkoa da PCR eta qPCRren arrakastarako.

2. Hautatu bero-hasiera Taq entzima entzima-potentzia handia duena

Taq entzimaren ahalmen entzimatikoa anplifikazio-eraginkortasunarekin lotuta dago.Orokorrean, abiarazte beroko Taq entzimaren potentzia entzimatikoa zenbat eta indartsuagoa izan, orduan eta luzeagoa izango da PCR anplifikazioaren hazkunde esponentziala, orduan eta "S itxurako" kurba tipikoagoa, orduan eta fluoreszentzia-seinalearen balio handiagoa eta PCR multiplexaren detekziorako egokiago.Potentzia entzimatiko ahula duten marka DNA polimerasek, oro har, 2-plexeko erreakzioak soilik onartzen dituzte.3-plex erreakzioak egitean, anplifikazio-kurba baxua da, fluoreszentzia-seinalearen balioa baxua da eta ez dago anplifikazio-kurba tipikorik, beraz, emaitzak zailak dira epaitzea.

3. Hautatu sentsibilitate handiko Taq entzima abiarazte beroa

Oro har, DNA polimerasak anplifikazio-eraginkortasun handia eta sentsibilitate handia ditu, baina inkoherentziak ere badaude.Anplifikatu beharreko laginaren xede-genearen ugaritasuna txikia bada, Taq entzimaren anplifikazio-sentsibilitatea probatzea gomendatzen da.Detekzio-metodo ohikoena xede genearen plasmidoaren zatiaren 10 edo 5 aldiz gradientearen diluzioa egitea da, PCR detekzioa diluizio txikiagoan egitea eta detekzio-sentsibilitate handiagoa duen abiarazte beroko Taq entzima hautatzea.

Goikotik ikus daiteke ikertzaileek beren eskakizun esperimentalen eta finantzaketa baldintzen arabera aukeratu behar dutela.Hobe da abiarazte beroko Taq entzimaren anplifikazio-eraginkortasuna eta sentikortasuna detektatzeko gradiente-diluzioaren anplifikazio-esperimentu bat egitea.

Foregene-ren adibide bat's Taq DNA polimerasa:

Foreasy HS Taq DNA Polimerasa

Deskribapena

Foreasy HS Taq DNA Polymerase Escherichia coli ingeniaritza bakterioetan adierazten den DNA polimerasa da, gene birkonbinazio teknologiaren bidez.Entzima erreakzio buffer berezi batekin konbinatzen da, eta horrek produktua oso erresistentea eta bateragarria egiten du, eta zuzenean erabil dezake laginaren lisatua (Foregene Lysis sistema) detekzio erreakzioetarako txantiloi gisa.

Aplikazio

Araztutako txantiloien eta araztu gabeko txantiloien PCR kualitatiboa eta PCR kuantitatiboa detektatzea.

Kalitate kontrola

1.Ez da nukleasa jarduera exogenorik detektatu

2.PCR metodoa ostalaririk gabeko DNA genomikoa detektatzeko

3.Kopia bakarreko geneak modu eraginkorrean handitu ditzake giza Genoman

4. Biltegiratu giro-tenperaturan astebetez, ez da jarduera aldaketarik nabaritzen

Produktuaren xehetasunak: https://www.foreivd.com/foreasy-hs-taq-dna-polymerase-product/