Odol RNA isolatzeko kit
Kitaren deskribapena:
Cat.No.RE-04011/04013
Odol osotik RNA guztizko arazketarako 104 ≤ Globulu zuriak ≤ 107
Azkar isolatu eta araztu odoleko RNA globulu zurietatik.
-Ez da kezkatu behar RNA degradazioaz.Kit osoa RNaserik gabekoa da
-Erraza: eragiketa guztiak giro-tenperaturan egiten dira
-Azkarra: eragiketa 20 minututan egin daiteke
-RNA errendimendu handia: RNA soilik Zutabeak eta formula bakarrak RNA eraginkortasunez arazteko
-Segurua: ez da erreaktibo organikorik erabiltzen
-Laginak prozesatzeko ahalmen handia: aldi bakoitzean 200μl-ko laginak prozesatu daitezke.
-Kalitate handikoa: araztutako RNA oso purua da, proteinarik eta bestelako ezpurutasunik gabea eta hainbat aplikazio esperimental bete ditzake.
Deskribapenak
Kitak gure enpresak garatutako spin-zutabea eta formula hartzen ditu, odol osoko antikoagulaziotik garbitasun handiko eta kalitate handiko RNA osoa modu eraginkorrean atera dezakeena.Kitak globulu gorriak lisatu (Buffer RCL) eskaintzen ditu, globulu gorriak azkar eta eraginkortasunez lisatu ditzake eta globulu zuriak atxiki ditzake.DNA garbitzeko zutabe eraginkorrak gainnatzailea eta zelulen lisadoak erraz bereiz ditzake eta DNA genomikoa xurgatu eta kendu.Eragiketa sinplea eta denbora aurreztea da;RNA soilik duen Zutabeak RNA modu eraginkorrean lotu dezake, eta formula berezi batekin, lagin kopuru handia prozesatu dezake aldi berean.
RNase-Free sistema osoak erauzitako RNA degradaezina egiten du;Buffer RW1 eta Buffer RW2 buffer garbiketa sistemak lortzen den RNA proteina, DNA, ioi eta konposatu organikoen kutsadurarik gabe uzten du.
Kitaren edukia
| Odol osoa RNA isolatzeko kit | ||
| Kitaren konposizioa | RE-04011 | RE-04013 |
| 50 aldiz | 200 aldiz | |
| Buffer RCL (10×) | 52,5 ml | 210 ml |
| Buffer BRL1* | 30 ml | 120 ml |
| Buffer BRL2 | 18 ml | 66 ml |
| Buffer RW1* | 25 ml | 100 ml |
| Buffer RW2 | 24 ml | 96 ml |
| RNasirik gabeko ddH2 O | 10 ml | 40 ml |
| RNA-bakarrik Zutabea | 50 multzo | 200 multzo |
| DNA-Garbiketa Zutabea | 50 multzo | 200 multzo |
| eskuliburua | 1 kopia | 1 kopia |
Ezaugarriak eta abantailak
-Ez da kezkatu behar RNA degradazioaz.Kit osoa RNaserik gabekoa da.
-Erraza: eragiketa guztiak giro-tenperaturan egiten dira.
-Azkarra: eragiketa 20 minututan egin daiteke.
-RNA errendimendu handia: RNA soilik Zutabeak eta formula bakarrak RNA eraginkortasunez arazteko.
-Segurua: ez da erreaktibo organikorik erabiltzen.
-Laginak prozesatzeko ahalmen handia: aldi bakoitzean 200μl-ko laginak prozesatu daitezke.
-Kalitate handikoa: araztutako RNA oso purua da, proteinarik eta bestelako ezpurutasunik gabea eta hainbat aplikazio esperimental bete ditzake.
Kitaren parametroak
Kit aplikazioa:
Ugaztunen odol osotik RNA osoa erauzteko eta arazteko egokia da.
Lan-fluxua
Biltegiratzeko baldintzak
Buffer RCL (10×) 2-8 ℃-tan gorde behar da;Kitaren beste osagaiak giro-tenperaturan gorde daitezke (15-25 ℃) baldintza lehorretan eta 12 hilabetez gorde daitezke.Buffer BRL1 4 ℃-tan gorde daiteke hilabetez β-mercaptoetanola gehitu ondoren (aukerakoa).
Oharra: tenperatura baxuan gordetzen bada, disoluzioa prezipitaziorako joera du.Ziurtatu soluzioa kitean jartzen duzula giro-tenperaturan erabili aurretik.Beharrezkoa izanez gero, berotu aurretik 37° C-ko ur-bainuan 10 minutuz prezipitatua disolbatzeko, eta ondo nahastu erabili aurretik.
Arazoak aztertzeko gidak
The following is an analysis of the problems that might be encountered in the extraction of viral RNA. We wish it would be helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems other than operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. Contact us if you need at : 028-83361257or E-mail：Tech@foregene.com。
Ezin da RNArik atera edo azido nukleikoaren etekina baxua da
Berreskurapen-eraginkortasuna eragiten duten faktore asko izan ohi dira, hala nola: laginaren RNA edukia, funtzionamendu-metodoa, eluzio-bolumena, etab.
Kausa arrunten analisia:
1.Izotz-bainua edo tenperatura baxuko (4 º C) zentrifugazioa funtzionamenduan zehar.
Iradokizuna: giro-tenperatura (15-25 º C) funtzionamendua, inoiz izotz-bainua eta tenperatura baxuko zentrifugatzailea.
2. Laginak biltegiratzea desegokia edo denbora gehiegiz gordetzea.
Iradokizuna: gorde laginak -80 º C-tan edo izoztu nitrogeno likidoan, eta saihestu izozte-desizoztu behin eta berriz erabiltzea;saia zaitez bildu berri diren laginak erabiltzen RNA erauzteko.
3.Laginaren lisi nahikoa
Gomendioa: ziurtatu lagina eta lan-disoluzioa (Akrilamida lineala) ondo nahastu direla eta 10 minutuz giro-tenperaturan (15-25 ºC) inkubatu direla.
4.Eluentea gaizki gehitu da
Gomendioa: Ziurtatu RNasarik gabeko ddH2O arazte-zutabearen mintzaren erdian gehitzen dela.
5.Etanol anhidroaren bolumen desegokia Buffer viRW2n
Iradokizuna: jarraitu argibideak, gehitu etanol anhidroaren bolumen egokia Buffer viRW2-ra eta nahastu ondo kit-a erabili aurretik.
6.Laginaren erabilera desegokia.
Iradokizuna: 200μl lagin Buffer viRL 500μl bakoitzeko.Gehiegizko laginaren bolumenak RNA erauzketa-tasa murriztuko du.
7.Eluzio bolumen desegokia edo eluzio osatugabea.
Iradokizuna: arazketa-zutabearen eluente-bolumena 30-50μl da;eluzio-efektua asegarria ez bada, aurrez berotutako RNaserik gabeko ddH gehitzea gomendatzen da.2O eta luzatu denbora giro-tenperaturan jarriz, esate baterako, 5-10min
8.Purification zutabeak etanol hondarrak ditu Buffer viRW2-n garbitu ondoren.
Iradokizuna: Buffer viRW2-n garbitu ondoren etanola oraindik geratzen bada eta 2 minutuz hodi hutsaren zentrifugazioan, arazte-zutabea giro-tenperaturan utzi daiteke 5 minutuz hodi-hutsean zentrifugatu ondoren, gainerako etanola guztiz kentzeko.
Araztutako RNA molekulen degradazioa
RNA araztuaren kalitatea laginak biltegiratzea, RNasaren kutsadura eta funtzionamendua bezalako faktoreekin lotuta dago.
Kausa arrunten analisia:
1. Bildutako laginak ez ziren garaiz gorde.
Iradokizuna: lagina jaso eta gero garaiz erabiltzen ez bada, gorde ezazu berehala -80 ℃ edo nitrogeno likidoan.RNA molekulak erauzteko, saiatu bildu berri diren laginak erabiltzen ahal den guztietan.
2.Bildutako laginak izoztu eta desizozten ari ziren behin eta berriz.
Iradokizuna: saihestu behin baino gehiagotan izoztea eta desizoztea (behin baino gehiagotan) laginak jaso eta biltegiratu bitartean, bestela azido nukleikoaren etekina gutxituko da.
3.RNasa ebakuntza-gelan sartu zen edo ez zen erabili eta botatzeko eskularrurik, maskararik, etab.
Iradokizuna: RNA molekulen esperimentua RNAren operazio-gela bereizi batean egiten da onena, eta mahai esperimentala garbitzen da esperimentua baino lehen.Erabili botatzeko eskularruak eta maskarak esperimentuan zehar, RNasa sartzeak eragindako RNA degradazioa saihesteko.
4.Erreaktiboa RNasarekin kutsatuta dago erabileran zehar.
Iradokizuna: Ordeztu RNA Biralaren Isolaketa Kit berriarekin erlazionatutako esperimentuetarako.
5.Hodi zentrifugatzaileen, pipeten punten, etab. RNasen kutsadura. Iradokizuna: Ziurtatu zentrifugatzaileen hodiak, pipetaren puntak eta pipetak RNasik gabekoak direla.
Araztutako RNA molekulek beherako esperimentuetan eragina izan zuten
Purifikazio-zutabeak araztutako RNA molekulek beherako esperimentuetan eragina izango dute gatz ioi edo proteina gehiegi baldin badaude, hala nola: alderantzizko transkripzioa, Northern Blot, etab.
1.Elututako RNA molekulen gainerako gatz ioiak daude.
Gomendioa: Ziurtatu Buffer viRW2-ra etanol anhidroaren bolumen egokia gehitu dela eta garbitu arazketa-zutabea birritan funtzionamendu-argibideetako zentrifugazio-abiadura zuzenaren arabera; oraindik gatz-ioiak geratzen badira, Buffer viRW2 gehi dezakezu arazketa-zutabean eta utzi giro-tenperaturan 5 minutuz.Ondoren, egin zentrifugazioa gatz ioien kutsadura neurririk handiena kentzeko
2.Elututako RNA molekulen etanola geratzen da
Iradokizuna: arazketa-zutabeak Buffer viRW2 bidez garbitu direla baieztatu ondoren, egin hodi hutsaren zentrifugazioa funtzionamendu-argibideetako abiadura zentrifugoaren arabera.Oraindik etanola geratzen bada, 5 minutuz utzi daiteke giro-tenperaturan hodi hutsaren zentrifugazioa egin ondoren, gainerako etanola neurririk handiena kentzeko.
Argibide eskuliburuak:
Viral RNA Isolation Kit Argibide Eskuliburua
