• facebook
  • linkedin
  • youtube
orri_bandera

Cell Direct RT qPCR Kit—SYBR GREEN I Zelula Lisis Zuzeneko Zelula Prest Urrats bakarreko qRT-PCR Kitak

Kitaren deskribapena:

Kat.Zk.DRT-01011/01012

Zelula zuzeneko RT-qPCR 10-1.000.000 zelula erabiliz,

eta RT-qPCR zuzenean zeluletatik egitea aldez aurretik RNA arazketarik gabe.

Zelulak zuzenean lisatzen dira RT-qPCRrako RNA askatzeko;tolerantzia handiko sistemak ez du beharrezkoa RNA arazteko eta zuzenean zelulen lisadoak erabiltzea RNA txantiloi gisa RT erreakzioetarako.Azkar eta erosoa;sentikortasun handia, espezifikotasun handia eta egonkortasun ona.

◮Sinplea eta eraginkorra: Cell Direct RT teknologiarekin, RNA laginak 7 minututan lor daitezke.

Laginaren eskaria txikia da, 10 gelaxka bezain baxua proba daiteke.

◮Errendimendu handia: azkar antzeman dezake RNA 384, 96, 24, 12, 6 putzuko plaketan hazitako zeluletan.

DNA Eraser-ek kaleratutako genomak azkar ken ditzake, eta geroko emaitza esperimentaletan eragina asko murrizten du.

RT eta qPCR sistema optimizatuak bi urratseko RT-PCR alderantzizko transkripzioa eraginkorragoa eta PCR zehatzagoa bihurtzen du, eta RT-qPCR erreakzio inhibitzaileekiko erresistenteagoa.


Produktuaren xehetasuna

Produktuen etiketak

ohiko galderak

Deskargatu baliabideak

Deskribapenak

Kit honek RT-qPCR erreakzioetarako hazitako zelulen laginetatik RNA azkar askatu dezakeen lisi-buffer-sistema berezia erabiltzen du, eta, horrela, denbora behar duen RNA arazteko prozesua ezabatzen du.RNA txantiloia 7 minututan lor daiteke.5×Zuzeneko RT Mix eta 2×Kitak eskaintzen dituen qPCR Mix-SYBR erreaktibo zuzenek denbora errealeko PCR emaitza kuantitatiboak azkar eta eraginkortasunez lor ditzakete.

5×Zuzeneko RT Mix eta 2×Zuzeneko qPCR Mix-SYBR-ek inhibitzaileen tolerantzia handia du, eta laginen lisatua RT-qPCRrako txantiloi gisa erabil daiteke zuzenean.Kit honek afinitate handiko Foregene alderantzizko transkriptasa eta D-Taq DNA polimerasa, dNTPs, MgCl ditu.2, erreakzio buffer, PCR optimizatzailea eta egonkortzailea.

Zehaztapenak

200×20μl Rxns, 1000×20μl Rxns

Kitaren osagaiak

I. zatia

Buffer CL

Foregene Protease Plus II

Buffer ST

II. zatia

DNA ezabagailua

5× RT nahasketa zuzena

2× Zuzeneko qPCR Mix-SYBR

50× ROX erreferentziako tindagaia

RNasik gabeko ddH2O

Argibideak

Ezaugarriak eta abantailak

Sinplea eta eraginkorra: Cell Direct RT teknologiarekin, RNA laginak 7 minututan lor daitezke.

■ Laginaren eskaria txikia da, 10 gelaxka bezain baxua proba daiteke.

■ Errendimendu handia: ARNa azkar hauteman dezake 384, 96, 24, 12, 6 putzuko plaketan hazitako zeluletan.

■ DNA Eraser-ek kaleratutako genomak azkar ken ditzake, eta geroko emaitza esperimentaletan eragina asko murrizten du.

■ RT eta qPCR sistema optimizatuak bi urratseko RT-PCR alderantzizko transkripzioa eraginkorragoa eta PCR zehatzagoa bihurtzen du, eta RT-qPCR erreakzio inhibitzaileekiko erresistenteagoa.

Kit aplikazioa

Aplikazio-esparrua: hazitako zelulak.

- Laginaren lisiaren bidez askatzen den RNA: kit honen RT-qPCR txantiloiari bakarrik dagokio.

- Kita helburu hauetarako erabil daiteke: gene-adierazpenaren analisia, siRNA bidezko gene isilarazteko efektua egiaztatzea, sendagaien baheketa, etab.

Diagrama

Cell Direct RT qPCR diagrama

Biltegiratzea eta Iraupena

Kit honen I. zatia 4 ℃-tan gorde behar da;II zatia -20 ℃-tan gorde behar da.

 Foregene Protease Plus II 4tan gorde behar da℃, ez izoztu -20 ℃-tan.

 Erreaktiboa 2×Zuzeneko qPCR Mix-SYBR -20-tan gorde behar dailuntasunean;maiz erabiltzen bada, 4an ere gorde daiteke℃ epe laburreko biltegiratzeko (erabili 10 eguneko epean).


  • Aurrekoa:
  • Hurrengoa:

  • Denbora errealeko PCR lehen diseinuaren printzipioak

    Aurrera eta Alderantzizko Primer

    Denbora errealeko PCRrako, lehen diseinua oso garrantzitsua da.Primerak PCR anplifikazioaren espezifikotasunarekin eta eraginkortasunarekin lotuta daude, eta printzipio hauei erreferentzia eginez diseinatu daitezke:

    Primer luzera: 18-30bp.

    GC edukia: % 40-60.

    Tm balioa: Primer diseinatzeko softwareak, Primer 5 adibidez, primeraren Tm balioa eman dezake.Goran eta beheran dauden primeren Tm balioak ahalik eta hurbilen egon behar dira.Tm kalkulu-formula ere erabil daiteke: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).PCR egitean, 5 °C-ko primer Tm balioaren azpiko tenperatura hautatzen da, oro har, annealing-tenperatura gisa (dagokion errekuntza-tenperaturaren igoerak PCR erreakzioaren espezifikotasuna areagotu dezake).

    Primerak eta PCR produktuak:

    Diseinuaren lehen PCR anplifikazio produktuaren luzera hobe da 100-150bp.

    Ahal den neurrian saihestu behar dira txantiloiaren bigarren mailako egitura-eremuan diseinu-inprimaketak.

    Saihestu 2 base osagarri edo gehiago sortzea urez gorako eta beheranzko primeren 3′ muturren artean.

    Primer 3′ terminal-oinarria ezin da egon ondoz ondoko 3 G edo C gehigarrirekin.

    Primerek berek ezin dute egitura osagarririk izan, bestela ilearen egitura bat sortuko da, PCR anplifikazioari eraginez.

    ATCG lehen sekuentzian ahalik eta modu berdinean banatu behar da, eta 3′ oinarri terminala saihestu behar da T gisa.

    1. eranskina: Cell Direct RT-qPCR Kit osagai osagarrien paketea

    1.Zelula Lisiaren Soluzioa


    Zelula Lisiaren Soluzioa

    Kitaren osagaiak

    (24 putzu lisi sistema / putzu)

    DRT-01011-A1

    DRT-01011-A2

    100 T

    500 T

    zatiaI

    Buffer CL

    20 ml

    100 ml

    Foregene Protease Plus II

    400 μl

    1 ml × 2

    Buffer ST

    1 ml × 2

    10 ml

    zatiaII

    DNA ezabagailua

    400 μl

    1 ml × 2

    2.RT nahasketa


    RT nahasketa

    Kitaren osagaiak

    (20 μl erreakzio-sistema)

    DRT-01011-B1

    200 T

    5× RT nahasketa zuzena

    800 μl

    RNasirik gabeko ddH2O

    1,7 ml × 2

     

    3.qPCR Mix


    qPCR nahasketa

    Kitaren osagaiak

    (20 μl erreakzio-sistema)

    DRT-01011-C1

    DRT-01011-C2

    200 T

    1000 T

    2× Zuzeneko qPCR Mix-SYBR

    1 ml × 2

    1,7 ml × 6

    50× ROX erreferentziako tindagaia

    40 μl

    200 μl

    RNasirik gabeko ddH2O

    1,7 ml

    10 ml

    Argibide eskuliburuak:

    QuickEasyTM Cell Direct RT-qPCR Kit-SYBR Green I

    Idatzi zure mezua hemen eta bidali iezaguzu