Zebra Fish Direct PCR Kit-UNG Direct PCR Lysis Erreaktiboa (zebrafish)
Deskribapenak
Kit honek lisi-buffer sistema berezia erabiltzen du DNA genomikoa azkar askatzeko zebra-arrainetatik eta ur gezako beste arrain-ehunetatik, isats-hegatsetatik edo arrain-arrautzen laginetatik PCR erreakzioetarako, beraz, bereziki egokia da eskala handiko proba genetikoetarako.Lisi-bufferretik DNA genomikoa askatzeko prozesua 10-30 minututan amaitzen da 65 °C-tan.Ez da beharrezkoa proteina eta RNA kentzea bezalako beste prozesurik, eta askatutako aztarna DNA PCR erreakziorako txantiloi gisa erabil daiteke.
2× PCR EasyTM Mix (UNG) dUTP-ren ordez dTTP erabiltzen du 2× PCR EasyTM Mix-en oinarrituta, eta aldi berean dUTP duen txantiloia degradatu dezakeen UNG entzima (Uracil-N-glycosylase) gehitzen du.PCR erreakzioaren aurretik, UNG entzima urakiloa duen PCR produktua degradatzeko erabiltzen da.UNG entzimak ez du inongo eraginik izango urazilorik ez duen txantiloian, horrela anplifikazioaren espezifikotasuna eta zehaztasuna bermatuz eta eskala handiko proba genetikoak egiteko aukera saihestuz.PCR produktuen kutsadura gertatu da.
D-Taq DNA polimerasa Foregenek PCR zuzeneko erreakzioetarako bereziki garatu duen DNA polimerasa da.D-Taq DNA polimerasak tolerantzia handia du PCR erreakzio inhibitzaile ezberdinekiko, eta DNAren arrastoak modu eraginkorrean handitu ditzake hainbat erreakzio-sistema konplexutan, eta anplifikazio-abiadura 2Kb/min irits daiteke, PCR zuzeneko erreakziorako bereziki egokia dena.
Zehaztapenak
50×20µl rxns, 200×20µl rxns, 500×20µl rxns, 2000×20µl rxns
Kitaren osagaiak
I. zatia | Buffer FP |
Proteasa aurreko genea | |
6× DNA kargatzeko buffer | |
II. zatia | 2 × PCR ErrazaTMNahasketa (UNG) |
Argibideak |
Ezaugarriak eta abantailak
■ Ez da denbora behar eta garestia den DNAren arazketa behar.
■ Laginaren eskaria txikia da, 1 mg arrain-hegats kaudal edo 10 arrautz arrautza baino gutxiago probatu daitezke.
■ Ez da tratamendu berezirik behar, hala nola ehotzea eta birrintzea, eta funtzionamendua erraza da.
■ Kutsaduraren aurkako PCR sistema 2× PCR EasyTM Mix (UNG), PCR produktuek eragindako kutsadura modu eraginkorrean ezabatzeko eta anplifikazioaren espezifikotasuna eta zehaztasuna bermatzeko.
■ PCR sistema optimizatuak PCR espezifikotasun handiagoa eta PCR erreakzio inhibitzaileekiko tolerantzia handiagoa izatea eragiten du.
Kitaren parametroak
Aplikazioa: zebra arraina eta ur gezako beste arrain batzuk.
Laginaren lisisetik askatzen den DNA: PCR txantiloi gisa bakarrik erabiltzen da.
Kita helburu hauetarako erabil daiteke: transgenosiaren identifikazioa, animalien genotipizazioa, etab.
Lan-fluxua
Biltegiratzea eta Iraupena
Kit honen I. zatia 2-8 ℃-tan gorde behar da.
Buffer FP erreaktiboa 12 hilabetez gorde daiteke baldintza lehorrean;2-8 ℃-tan gorde daiteke biltegiratze luzeagorako.
v Erreaktiboak Foregene Proteasak formula berezia du.Bere jarduera eta egonkortasuna ziurtatzeko, gorde ezazu 4 ℃-tan 12 hilabetez.
vReagent 6×DNA Loading Buffer 4 ℃ edo -20 ℃-tan gorde daiteke denbora luzez.
Kit honen II. zatia -20 ℃-tan gorde behar da.
vReagent 2×PCR EasyTM Mix (UNG), maiz erabiltzen bada, 4 ℃-tan ere gorde daiteke epe laburreko biltegiratzeko (10 eguneko epean erabili).