• facebook
  • linkedin
  • youtube
English
orri_bandera

Foreasy HS Taq DNA Polimerasa

Foreasy HS Taq DNA Polymerase Irudi aipagarria
  • Foreasy HS Taq DNA Polimerasa

Kitaren deskribapena:

◮Espezifikotasun handia: abiarazte beroko jarduera handia duen entzima.

◮Anplifikazio azkarra: 10 seg/kb.

◮Txantiloiaren moldagarritasun handia : High modu eraginkorrean anplifikatzeko erabil daitekeGCbalioaetaanplifikatzeko zailak diren hainbat DNA txantiloi.

◮Fideltasun sendoa: fideltasuna 6 aldiz daof Taq entzima arrunta.

aurreko indarra


Produktuaren xehetasuna

Produktuen etiketak

ohiko galderak

Deskribapena

Foreasy HS Taq DNA Polimerasa Escherichia coli ingeniaritza bakterioetan adierazten den Taq entzima berri bat da, gene birkonbinazio teknologiaren bidez.Entzima prozesu berezi batekin tratatu ondoren, da's jarduera aktibazio termikoaren aurretik inhibitzen da, eta, ondorioz, tenperatura baxuko baldintzetan abiarazteen edo primer dimeroen errekuzimendu ez-espezifikoa eragiten duen anplifikazio ez-espezifikoa inhibitzen da.Produktu hau PCR React oso zehatzetarako egokia daioia, x PCR anitz, GC eduki handia (>% 60),rekinbigarren mailako egituraedo bestehondoko genoma sendoaikakanplifikazioa eta eskala handiko genomaikakanplifikazioa detektatzeko.Entzimak 5' → 3' DNA polimerasa aktibitatea eta 5' → 3' exonukleasa jarduera du, baina 3' → 5' exonukleasa jarduerarik ez.

Kitaren osagaiak

Osagaia IM-01021 IM-01022 IM-01023
Foreasy HS Taq DNA polimerasa (5 U/μL)  5000 U (1 ml)  50 KU (10 ml)  500 KU (100 ml)
2× Taq Erreakzio Buffer  25 ml × 5  250 ml × 5  500 ml × 25

Ezaugarriak eta abantailak

- Espezifikotasun handia: abiarazte beroko jarduera handia duen entzima.

- Anplifikazio azkarra: 10 seg/kb.

- Txantiloiaren moldagarritasun handia: High modu eraginkorrean anplifikatzeko erabil daitekeGCbalioaetaanplifikatzeko zailak diren hainbat DNA txantiloi.

- Fideltasun sendoa: fideltasuna 6 aldiz daof Taq entzima arrunta.

Kit aplikazioa

- Hainbat PCR/qPCR Sistema eta zuzeneko PCR sistema

- PCR Amplified DNA Fragment

- DNA marka

- DNAren sekuentziazioa

- PCR gehi A isatsa

Jardueraren definizioa

1U: 10 nmol sartzeko behar den entzima-kopuruaDNAazidoan disolbaezin den gai batean izokin-esperma aktibatuta dagoen DNA txantiloi / primer gisa erabiliz, 74 °C, 30 minutu.

Erreakzio Baldintza

Tenperatura Erreakzio Denbora Ziklo-denbora
37°C 5 min 1
94°C 5 min 1
94°C 10 segundo  40
60°C 10 segundo

Ohar:10 µL eta 20 µL sistemetarako, gehitu olio mineral bolumen berdina termoziklatuek estalki berorik ez badu.

PCR erreakzio-baldintzak txantiloien, primeren eta antzekoen egitura-baldintzen arabera aldatzen dira.Eragiketa espezifikoan, beharrezkoa da erreakzio-baldintza optimoak diseinatzea, errekuntza-tenperatura, luzapen-denbora, etab. barne, baldintza espezifikoen arabera, hala nola txantiloi mota, xede-zatiaren tamaina, anplifikatutako zatiaren oinarri-sekuentzia eta GC edukia eta hasierako luzera.

Biltegiratzea

-20 ± 5 °C 2 urtez edo -80 °C-tan epe luzerako biltegiratzeko.

  • Aurrekoa:
  • Hurrengoa:

    • Anplifikazio seinalerik ez

    1.Kitaren Taq DNA Polimerasak bere jarduera galtzen du kitaren biltegiratze desegokiagatik edo iraungitzeagatik.
    Gomendioa: berretsi kitaren biltegiratze-baldintzak;gehitu berriro Taq DNA polimerasa kopuru egoki bat PCR sistemara edo erosi denbora errealeko PCR kit berri bat erlazionatutako esperimentuetarako.

    2.ADN txantiloian Taq DNA Polimerasaren inhibitzaile asko daude.
    Iradokizuna: txantiloia birraztu edo erabilitako txantiloi kopurua murriztu.

    3.Mg2+ kontzentrazioa ez da egokia.
    Gomendioa: eskaintzen dugun 2× Real PCR Mixaren Mg2+ kontzentrazioa 3,5 mM da.Hala ere, lehen eta txantiloi berezi batzuetarako, Mg2+ kontzentrazioa handiagoa izan daiteke.Hori dela eta, zuzenean MgCl2 gehi dezakezu Mg2+ kontzentrazioa optimizatzeko.Optimizatzeko aldi bakoitzean Mg2+ 0.5mM handitzea gomendatzen da.

    4.PCR anplifikazio-baldintzak ez dira egokiak, eta primer-sekuentzia edo kontzentrazioa desegokia da.
    Iradokizuna: berretsi abiarazlearen sekuentziaren zuzena eta abiarazlea ez dela degradatu;anplifikazio-seinalea ona ez bada, saiatu erretiro-tenperatura jaisten eta lehen-kontzentrazioa egoki egokitzen.

    5. Txantiloi kopurua gutxi edo gehiegi da.
    Gomendioa: Egin txantiloiaren linealizazio-gradientearen diluzioa eta hautatu denbora errealeko PCR esperimenturako PCR efektu onena duen txantiloiaren kontzentrazioa.

    NTC fluoreszentzia balio handiegia du

    1.Erreaktiboen kutsadura funtzionamenduan eragindakoa.
    Gomendioa: Ordeztu denbora errealeko PCR esperimentuetarako erreaktibo berriekin.

    2.PCR erreakzio-sistema prestatzerakoan kutsadura gertatu da.
    Gomendioa: Hartu behar diren babes-neurriak funtzionatzerakoan, hala nola: latexezko eskularruak jantzita, iragazkidun pipeta-punta erabiltzea, etab.

    3.Primerak degradatu egiten dira, eta abiarazleak degradatzeak anplifikazio ez-espezifikoa eragingo du.
    Iradokizuna: Erabili SDS-PAGE elektroforesia abiarazleak degradatuta dauden ala ez detektatzeko, eta ordeztu lehengai berriekin Denbora errealeko PCR esperimentuetarako.

    Primer dimeroa edo anplifikazio ez-espezifikoa

    1.Mg2+ kontzentrazioa ez da egokia.
    Gomendioa: eskaintzen dugun 2× Real PCR EasyTM Mixaren Mg2+ kontzentrazioa 3,5 mM da.Hala ere, lehen eta txantiloi berezi batzuetarako, Mg2+ kontzentrazioa handiagoa izan daiteke.Hori dela eta, zuzenean MgCl2 gehi dezakezu Mg2+ kontzentrazioa optimizatzeko.Optimizatzeko aldi bakoitzean Mg2+ 0.5mM handitzea gomendatzen da.

    2.PCR annealing tenperatura baxuegia da.
    Iradokizuna: handitu PCR errekostatzeko tenperatura 1 ℃ edo 2 ℃ bakoitzean.

    3.PCR produktua luzeegia da.
    Gomendioa: Denbora errealeko PCR produktuaren iraupena 100-150 bp artekoa izan behar du, ez 500 bp baino gehiago.

    4.Primerak degradatu egiten dira, eta abiarazleen degradazioak anplifikazio espezifikoa agertzea ekarriko du.
    Iradokizuna: Erabili SDS-PAGE elektroforesia abiarazleak degradatuta dauden ala ez detektatzeko, eta ordeztu lehengai berriekin Denbora errealeko PCR esperimentuetarako.

    5.PCR sistema desegokia da, edo sistema txikiegia da.
    Iradokizuna: PCR erreakzio-sistema txikiegia izateak detekzio-zehaztasuna gutxituko du.Hobe da PCR kuantitatiboko tresnak gomendatutako erreakzio-sistema erabiltzea Real Time PCR esperimentua berriro exekutatzeko.

    Balio kuantitatiboen errepikakortasun eskasa

    1. Tresna gaizki funtzionatzen ari da.
    Iradokizuna: akatsak egon daitezke tresnaren PCR zulo bakoitzaren artean, tenperaturaren kudeaketan edo detekzioan erreproduzigarritasun eskasa eraginez.Mesedez, egiaztatu dagokion tresnaren argibideen arabera.

    2.Laginaren garbitasuna ez da ona.
    Gomendioa: lagin ezgabeek esperimentuaren erreproduzigarritasun eskasa ekarriko dute, txantiloiaren eta lehengaien purutasuna barne.Hobe da txantiloia birraztea, eta lehengaiak SDS-PAGE bidez garbitzen dira.

    3.PCR sistema prestatzeko eta biltegiratzeko denbora luzeegia da.
    Iradokizuna: Erabili denbora errealeko PCR sistema PCR esperimenturako prestatu eta berehala, eta ez utzi denbora luzez alde batera utzita.

    4.PCR anplifikazio-baldintzak ez dira egokiak, eta primer-sekuentzia edo kontzentrazioa desegokia da.
    Iradokizuna: berretsi abiarazlearen sekuentziaren zuzena eta abiarazlea ez dela degradatu;anplifikazio-seinalea ona ez bada, saiatu erretiro-tenperatura jaisten eta lehen-kontzentrazioa egoki egokitzen.

    5.PCR sistema desegokia da, edo sistema txikiegia da.
    Iradokizuna: PCR erreakzio-sistema txikiegia izateak detekzio-zehaztasuna gutxituko du.Hobe da PCR kuantitatiboko tresnak gomendatutako erreakzio-sistema erabiltzea Real Time PCR esperimentua berriro exekutatzeko.

    Idatzi zure mezua hemen eta bidali iezaguzu

    ErlazionatuaProduktuak

    Sakatu Sartu bilatzeko edo ESC ixteko