RNA birala isolatzeko kit, plasma, suero eta beste laginetatik RNA birikoaren arazketarako
Kitaren deskribapena:
Kat.Zk.RE-02011/02014
RNA birikoa plasmatik, suerotik, zelularik gabeko gorputz-fluidoetatik, zelula-kulturako gainnatzaileetatik arazteko.
Azkar isolatu eta araztu RNA birikoa, hala nola, plasma, serum, zelularik gabeko gorputz-fluidoetatik eta zelula-kulturako gainnatzaileetatik.
-Ez da kezkatu behar RNA degradazioaz.Kit osoa RNaserik gabekoa da
-Erraza: eragiketa guztiak giro-tenperaturan egiten dira
-Azkarra: eragiketa 20 minututan egin daiteke
-RNA errendimendu handia: RNA soilik Zutabeak eta formula bakarrak RNA eraginkortasunez arazteko
-Segurua: ez da erreaktibo organikorik erabiltzen
-Laginak prozesatzeko ahalmen handia: aldi bakoitzean 200μl-ko laginak prozesatu daitezke.
-Kalitate handikoa: araztutako RNA oso purua da, proteinarik eta bestelako ezpurutasunik gabea eta hainbat aplikazio esperimental bete ditzake.
Deskribapenak
Kitak Foregene-k garatutako spin-zutabea eta formula erabiltzen ditu, zeinak eraginkortasunez atera ditzakeen garbitasun handiko eta kalitate handiko RNA birikoa, hala nola plasma, serum, zelularik gabeko gorputz-fluido eta zelula-kulturaren gainditzaileetatik.Kitak akrilamida lineala gehitzen du bereziki, laginetatik RNA kopuru txikiak erraz har ditzake.RNA-Only Zutabeak RNA modu eraginkorrean lotu dezake.Kitak lagin kopuru handia prozesatu dezake aldi berean.
Kit osoak ez du RNasarik, beraz, RNA araztua ez da degradatuko.Buffer viRW1 eta Buffer viRW2 lortutako azido nukleiko birikoa proteinarik, nukleasarik edo bestelako ezpurutasunik gabe dagoela ziurta dezakete, zuzenean biologia molekularreko esperimentuetarako erabil daitekeela.
Zehaztapenak
50 prestaketa, 200 prestaketa
Kitaren osagaiak
| Akrilamida lineala |
| Buffer viRL |
| Buffer viRW1, Buffer viRW2 |
| RNasirik gabeko ddH2O |
| RNA-bakarrik zutabea |
| Argibideak |
Ezaugarriak eta abantailak
-Ez da kezkatu behar RNA degradazioaz.Kit osoa RNaserik gabekoa da
-Erraza: eragiketa guztiak giro-tenperaturan egiten dira
-Azkarra: eragiketa 20 minututan egin daiteke
-RNA errendimendu handia: RNA soilik Zutabeak eta formula bakarrak RNA eraginkortasunez arazteko
-Segurua: ez da erreaktibo organikorik erabiltzen
-Laginak prozesatzeko ahalmen handia: aldi bakoitzean 200μl-ko laginak prozesatu daitezke.
-Kalitate handikoa: araztutako RNA oso purua da, proteinarik eta bestelako ezpurutasunik gabea eta hainbat aplikazio esperimental bete ditzake.
Kitaren parametroak
Kit aplikazioa:
RNA birikoa erauzteko eta arazteko egokia da plasma, serum, zelularik gabeko gorputz-likidoa eta zelula-kulturaren gainnatzailea bezalako laginetan.
Lan-fluxua
Biltegiratzeko baldintzak
- Kita 24 hilabetez gorde daiteke giro-tenperaturan (15-25 ℃), edo 2-8 ℃ denbora luzeagoan.
-Akrilamida disoluzio lineala giro-tenperaturan gorde daiteke 7 egunez.Kita jaso ondoren, atera akrilamida lineala disoluzioa eta gorde -20 ℃-tan.
-Akrilamida lineala Buffer viRLra gehitu ondoren, 2-8 ℃-tan gorde daiteke 48 ordu arte.Mesedez, erabili prestatutako soluzio freskoa.
Arazoak aztertzeko gidak
The following is an analysis of the problems that might be encountered in the extraction of viral RNA. We wish it would be helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems other than operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. Contact us if you need at : 028-83361257or E-mail：Tech@foregene.com。
Ezin da RNArik atera edo azido nukleikoaren etekina baxua da
Berreskurapen-eraginkortasuna eragiten duten faktore asko izan ohi dira, hala nola: laginaren RNA edukia, funtzionamendu-metodoa, eluzio-bolumena, etab.
Kausa arrunten analisia:
1.Izotz-bainua edo tenperatura baxuko (4 º C) zentrifugazioa funtzionamenduan zehar.
Iradokizuna: giro-tenperatura (15-25 º C) funtzionamendua, inoiz izotz-bainua eta tenperatura baxuko zentrifugatzailea.
2. Laginak biltegiratzea desegokia edo denbora gehiegiz gordetzea.
Iradokizuna: gorde laginak -80 º C-tan edo izoztu nitrogeno likidoan, eta saihestu izozte-desizoztu behin eta berriz erabiltzea;saia zaitez bildu berri diren laginak erabiltzen RNA erauzteko.
3.Laginaren lisi nahikoa
Gomendioa: ziurtatu lagina eta lan-disoluzioa (Akrilamida lineala) ondo nahastu direla eta 10 minutuz giro-tenperaturan (15-25 ºC) inkubatu direla.
4.Eluentea gaizki gehitu da
Gomendioa: Ziurtatu RNasarik gabeko ddH2O arazte-zutabearen mintzaren erdian gehitzen dela.
5.Etanol anhidroaren bolumen desegokia Buffer viRW2n
Iradokizuna: jarraitu argibideak, gehitu etanol anhidroaren bolumen egokia Buffer viRW2-ra eta nahastu ondo kit-a erabili aurretik.
6.Laginaren erabilera desegokia.
Iradokizuna: 200μl lagin Buffer viRL 500μl bakoitzeko.Gehiegizko laginaren bolumenak RNA erauzketa-tasa murriztuko du.
7.Eluzio bolumen desegokia edo eluzio osatugabea.
Iradokizuna: arazketa-zutabearen eluente-bolumena 30-50μl da;eluzio-efektua asegarria ez bada, aurrez berotutako RNaserik gabeko ddH gehitzea gomendatzen da.2O eta luzatu denbora giro-tenperaturan jarriz, esate baterako, 5-10min
8.Purification zutabeak etanol hondarrak ditu Buffer viRW2-n garbitu ondoren.
Iradokizuna: Buffer viRW2-n garbitu ondoren etanola oraindik geratzen bada eta 2 minutuz hodi hutsaren zentrifugazioan, arazte-zutabea giro-tenperaturan utzi daiteke 5 minutuz hodi-hutsean zentrifugatu ondoren, gainerako etanola guztiz kentzeko.
Araztutako RNA molekulen degradazioa
RNA araztuaren kalitatea laginak biltegiratzea, RNasaren kutsadura eta funtzionamendua bezalako faktoreekin lotuta dago.
Kausa arrunten analisia:
1. Bildutako laginak ez ziren garaiz gorde.
Iradokizuna: lagina jaso eta gero garaiz erabiltzen ez bada, gorde ezazu berehala -80 ℃ edo nitrogeno likidoan.RNA molekulak erauzteko, saiatu bildu berri diren laginak erabiltzen ahal den guztietan.
2.Bildutako laginak izoztu eta desizozten ari ziren behin eta berriz.
Iradokizuna: saihestu behin baino gehiagotan izoztea eta desizoztea (behin baino gehiagotan) laginak jaso eta biltegiratu bitartean, bestela azido nukleikoaren etekina gutxituko da.
3.RNasa ebakuntza-gelan sartu zen edo ez zen erabili eta botatzeko eskularrurik, maskararik, etab.
Iradokizuna: RNA molekulen esperimentua RNAren operazio-gela bereizi batean egiten da onena, eta mahai esperimentala garbitzen da esperimentua baino lehen.Erabili botatzeko eskularruak eta maskarak esperimentuan zehar, RNasa sartzeak eragindako RNA degradazioa saihesteko.
4.Erreaktiboa RNasarekin kutsatuta dago erabileran zehar.
Iradokizuna: Ordeztu RNA Biralaren Isolaketa Kit berriarekin erlazionatutako esperimentuetarako.
5.Hodi zentrifugatzaileen, pipeten punten, etab. RNasen kutsadura. Iradokizuna: Ziurtatu zentrifugatzaileen hodiak, pipetaren puntak eta pipetak RNasik gabekoak direla.
Araztutako RNA molekulek beherako esperimentuetan eragina izan zuten
Purifikazio-zutabeak araztutako RNA molekulek beherako esperimentuetan eragina izango dute gatz ioi edo proteina gehiegi baldin badaude, hala nola: alderantzizko transkripzioa, Northern Blot, etab.
1.Elututako RNA molekulen gainerako gatz ioiak daude.
Gomendioa: Ziurtatu Buffer viRW2-ra etanol anhidroaren bolumen egokia gehitu dela eta garbitu arazketa-zutabea birritan funtzionamendu-argibideetako zentrifugazio-abiadura zuzenaren arabera; oraindik gatz-ioiak geratzen badira, Buffer viRW2 gehi dezakezu arazketa-zutabean eta utzi giro-tenperaturan 5 minutuz.Ondoren, egin zentrifugazioa gatz ioien kutsadura neurririk handiena kentzeko
2.Elututako RNA molekulen etanola geratzen da
Iradokizuna: arazketa-zutabeak Buffer viRW2 bidez garbitu direla baieztatu ondoren, egin hodi hutsaren zentrifugazioa funtzionamendu-argibideetako abiadura zentrifugoaren arabera.Oraindik etanola geratzen bada, 5 minutuz utzi daiteke giro-tenperaturan hodi hutsaren zentrifugazioa egin ondoren, gainerako etanola neurririk handiena kentzeko.
Argibide eskuliburuak:
Viral RNA Isolation Kit Argibide Eskuliburua
