Zuzeneko RT-qPCR Kit
Deskribapena
RT-qPCR zuzeneko kitak RT-qPCR buffer eta eraginkortasun handiko entzima bereizita paketatu ditunahasketa (Taq、M-MLV、RI), back-end kitak eta sistemak sortzeko erosoa bihurtuzdoikuntza, egiaztapen sinplearen barruan.
Zehaztapenak
500T, 50.000T
Kitaren osagaiak
Kitaren edukia (20 μL erreakzio-sistema) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
500 T | 50.000 T | |
Entzima Nahasketa Zuzena | 500 μL×1 | 50 ml×1 |
2 × RT-qPCR Buffer zuzena | 1 ml×5 | 500 ml×1 |
Instrukzioa | 1 | 1 |
Urrats operatiboak
Erreaktiboak prestatu aurretik, kitaren erreaktibo guztiak giro-tenperaturan desizoztu eta astiro-astiro nahastu behar dira.
A: Prestatu of txantiloia eta erreaktiboa
1. Prestatu prestatutako RNA txantiloia (Foregene Total RNA Isolation Kit serieko kit-a erabiltzea gomendatzen da RNA txantiloia ateratzeko eta arazteko) edo laginak pitzatzeko produktua (Foregene Lysis sistema erabiltzea gomendatzen da), hasierako espezifikoak (10 μM) eta beste kontsumigarri garrantzitsuak, tresna.
2. Jarri 2 × RT-qPCR Buffer zuzena, RNasarik gabeko ddH2O eta 20 × ROX erreferentziako tindagaia (baldin bada'behar dira) izotz-kutxan, hauek modu naturalean urtu eta astiro-astiro nahastuz.
B: Prestatu of RT-qPCR sistema
Taula 1 : Prestatu of RT-qPCR ssistema
Osagaia | Bolumena | Azken kontzentrazioa |
2 × RT-qPCR Buffer zuzena | 10 μL | 1× |
Entzima Nahasketa Zuzena | 1μL | |
Aurrerako lehen planoa (10 μM) | 0,8 μL | 50-900nM |
Alderantzizko Primer (10 μM) | 0,8 μL | 50-900nM |
Zunda (4 μM) | 1μL | 200nM |
Txantiloia (RNA edo lisatua) | X μL | |
20×ROX erreferentziako tindaketa | - | 1* |
RNase-FreeddH2O | (6,4-X) μL | |
Bolumen osoa | 20μL |
C: Ezarri du RT-qPCR erreakzioa programa
Taula 2 : RT-qPCR erreakzionatuon programa ezarpena (rentzat adibidea: bi-urratsa metodoa)
Urratsa | Tenperatura | Denbora | Zikloak | Edukia | |
1 | 50℃ | 15 min | 1* | 1 | Alderantzizko transkripzioa |
2 | 95℃ | 1 min | 1 | Desnaturalizazioaren aurrekoa | |
3 | 95℃ | 10 seg | 40-45 | Desnaturalizazioa | |
60℃ | 30 segundo 2* | Erretiroa/Luzapena |
Biltegiratzea eta Iraupena
-Kit-a -20tan gorde behar da± 5℃.Baliozko epea 12 hilabetekoa da.
-Izozte-desizozte-ziklo errepikatuak saihestu (<5 ziklo).