ForeDirect RT-qPCR Kit
Kitaren deskribapena:
◮RNA denbora errealean zuzeneko anplifikaziorako swab-bildumetatik RNA arazteko prozesurik gabe.Kit honek qRT-PCR zikloak ordubeteko epean osatzen ditu.Entzima nahasketa alderantzizko transkriptasa, Hot-Start Taq DNA polimerasa, RNasa inhibitzailea nahasketa optimizatua da.Erreakzio Bufferak beharrezkoak diren osagai guztiak ditu, optimizatutako buffer osagaiak barne, Mg2+, dUTP eta dNTPak.
Deskribapena
ForeDirect RT-qPCR Kit RNA arazketa prozesurik gabe denbora errealean zuzeneko anplifikaziorako diseinatuta dago.Kit honek qRT-PCR zikloak ordubeteko epean osatzen ditu.Entzima nahasketa alderantzizko transkriptasa, Hot-Start Taq DNA polimerasa, RNasa inhibitzailea nahasketa optimizatua da.Erreakzio Bufferak beharrezkoak diren osagai guztiak ditu, optimizatutako buffer osagaiak barne, Mg2+, dUTP eta dNTPak.
Zehaztapenak
100T
Kitaren osagaiak
| Azido nukleikoak askatzeko agentea |
| RNA babeslea |
| 2× RT-qPCR Buffer |
| Entzima nahasketa (Taq&M-MLV) |
| Argibideak |
PCR aplikazioa
1. PCR erreakzio-hodiak labur zentrifugatu ondoren, jarri anplifikazio-tresnaren lagin-tanga.
2. Protokolo termikoa
| Urratsa | Tenperatura | Denbora | Zikloak | |
| 1 | Alderantzizko transkripzioa | 50℃ | 15 min | 1 |
| 2 | Desnaturalizazioaren aurrekoa | 95℃ | 1 min | 1 |
| 3 | Desnaturalizazioa | 95℃ | 10 segundo | 42 |
| 4 | Erretiroa/Luzapena | 60℃ | 30 segundo | |
Ohar:Seinale fluoreszentea detektatu zen ziklo bakoitzaren luzapen-urratsaren ondoren.
3. Ezarri ondoren, gorde fitxategia eta exekutatu erreakzio programa.
Urrats operatiboak
Erreaktiboak prestatu aurretik, kitaren erreaktibo guztiak giro-tenperaturan desizoztu eta astiro-astiro nahastu behar dira.
Erreaktiboak prestatzea
1. Prestatu Azido Nukleikoen Askapen Nahasketa
| Osagaia | Lagin edo Kontrol bakoitzeko bolumena |
| Azido nukleikoak askatzeko agentea | 5μL |
| RNA babeslea | 0,5 μL |
2. Prestatu Erreakzio Nahasketa
| Osagaia | Lagin edo Kontrol bakoitzeko bolumena |
| 2× RT-qPCR Buffer | 15 μL |
| Entzima nahasketa (Taq&M-MLV) | 1,5 μL |
| Inprimagailuak eta zundak | 1μL |
Biltegiratzea eta Iraupena
-Kit-a -20tan gorde behar da± 5℃.Baliozko epea 12 hilabetekoa da.
-Izozte-desizozte-ziklo errepikatuak saihestu (<5 ziklo).
